Przejdź do treści
Lenti-X293T
Chusteczka
Nerka embrionalna
Choroba
Przekształcona linia komórkowa (komórki HEK przekształcone DNA adenowirusa typu 5)
Synonimy
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Dokumenty

Lenti-X293T

Cell line · Numer produktu 305820

Komórki Lenti-X293T są pochodną linii komórek ludzkiej embrionalnej nerki 293T, zmodyfikowaną i zoptymalizowaną specjalnie pod kątem wysokowydajnego wektora lentiwirusowego...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki Lenti-X293T są pochodną linii komórek ludzkiej nerki embrionalnej 293T, zmodyfikowanych i zoptymalizowanych specjalnie pod kątem wysokowydajnej produkcji wektorów lentiwirusowych. Podobnie jak komórki macierzyste 293T, stabilnie wyrażają one duży antygen T wirusa SV40, który umożliwia epizomalną replikację plazmidów zawierających początek replikacji SV40 i znacznie zwiększa wydajność transfekcji przejściowej. Komórki Lenti-X293T wykazują przylegającą morfologię nabłonkową i silne właściwości wzrostowe w standardowych warunkach hodowli z dodatkiem surowicy, co sprzyja hodowli o wysokiej gęstości, odpowiedniej do produkcji wirusów na dużą skalę.

Linia komórkowa została wybrana ze względu na doskonałą wydajność transfekcji przy użyciu odczynników na bazie fosforanu wapnia, lipidów lub polimerów, co skutkuje stale podwyższonym mianem lentiwirusów w porównaniu z konwencjonalnymi populacjami HEK293T. Zwiększona produkcja wirusa wynika z optymalizacji fizjologii komórek, która wspiera skuteczne pobieranie plazmidów, silną ekspresję transgenów oraz skuteczne składanie i uwalnianie cząstek lentiwirusowych niezdolnych do replikacji w przypadku współtransfekcji z odpowiednimi konstrukcjami opakowaniowymi i otoczki. Komórki Lenti-X293T są zatem szeroko stosowane do wytwarzania wektorów lentiwirusowych trzeciej generacji w zastosowaniach związanych z dostarczaniem genów, edycją genów i inżynierią stabilnych linii komórkowych.

Komórki Lenti-X293T zachowują ogólną użyteczność systemów pochodnych HEK293 do badań nad ekspresją białek rekombinowanych na wysokim poziomie i przejściową ekspresją genów. Ich stabilne właściwości wzrostowe i powtarzalna wydajność sprawiają, że nadają się one zarówno do zastosowań badawczych na małą skalę, jak i do skalowalnych ustawień produkcyjnych, pod warunkiem przestrzegania standardowych wytycznych dotyczących bezpieczeństwa biologicznego i pakowania wektorów dla systemów lentiwirusowych.

Chusteczka
Nerka embrionalna
Choroba
Przekształcona linia komórkowa (komórki HEK przekształcone DNA adenowirusa typu 5)
Zastosowania
Produkcja wektorów lentiwirusowych; transfekcja przejściowa; ekspresja białek rekombinowanych na wysokim poziomie; pakowanie wirusów
Synonimy
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Typ komórki
Embrionalne komórki nabłonkowe nerki
Nowotworotwórczy
nowotworowy u myszy z obniżoną odpornością (dla 293T)
Status ploidii
Aneuploid, hipotriploid (zgłoszony dla 293T)
Karyotyp
Aneuploidalny kariotyp człowieka z wieloma nieprawidłowościami chromosomowymi (typowymi dla 293T)
Czas podwojenia
20–24 godziny

04Identyfikatory

Źródło
Lenti-X293T (numer katalogowy Cytion 305820)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Antygen T wirusa SV40
Ekspresja antygenu
Antygen T wirusa SV40
Onkogeny
Antygen T wirusa SV40
Profil mutacji
Nie w pełni scharakteryzowany; zawiera zintegrowany adenowirus 5 DNA i konstrukt dużego antygenu T SV40.
Wirusy
Zawiera DNA adenowirusa typu 5; wyraża duży antygen T wirusa SV40.
Podatność na wirusy
Wysoka tolerancja na produkcję lentiwirusów

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Rozdzielić przed osiągnięciem pełnego połączenia; po rozmrożeniu odczekać do 48 godzin, aby uzyskać pełne połączenie.
Współczynnik podziału
Zalecany stosunek wynosi od 1:5 do 1:10.
Gęstość wysiewu
2 do 4 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
Co 2-3 dni
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
Płód