
- Chusteczka
- Nerka embrionalna
- Choroba
- Przekształcona linia komórkowa (komórki HEK przekształcone DNA adenowirusa typu 5)
- Synonimy
- Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T
Dokumenty
Lenti-X293T
Cell line · Numer produktu 305820
Komórki Lenti-X293T są pochodną linii komórek ludzkiej embrionalnej nerki 293T, zmodyfikowaną i zoptymalizowaną specjalnie pod kątem wysokowydajnego wektora lentiwirusowego...
Dostosowanie / Zalecenia
- Lenti-X293TCell line€550.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Komórki Lenti-X293T są pochodną linii komórek ludzkiej nerki embrionalnej 293T, zmodyfikowanych i zoptymalizowanych specjalnie pod kątem wysokowydajnej produkcji wektorów lentiwirusowych. Podobnie jak komórki macierzyste 293T, stabilnie wyrażają one duży antygen T wirusa SV40, który umożliwia epizomalną replikację plazmidów zawierających początek replikacji SV40 i znacznie zwiększa wydajność transfekcji przejściowej. Komórki Lenti-X293T wykazują przylegającą morfologię nabłonkową i silne właściwości wzrostowe w standardowych warunkach hodowli z dodatkiem surowicy, co sprzyja hodowli o wysokiej gęstości, odpowiedniej do produkcji wirusów na dużą skalę.
Linia komórkowa została wybrana ze względu na doskonałą wydajność transfekcji przy użyciu odczynników na bazie fosforanu wapnia, lipidów lub polimerów, co skutkuje stale podwyższonym mianem lentiwirusów w porównaniu z konwencjonalnymi populacjami HEK293T. Zwiększona produkcja wirusa wynika z optymalizacji fizjologii komórek, która wspiera skuteczne pobieranie plazmidów, silną ekspresję transgenów oraz skuteczne składanie i uwalnianie cząstek lentiwirusowych niezdolnych do replikacji w przypadku współtransfekcji z odpowiednimi konstrukcjami opakowaniowymi i otoczki. Komórki Lenti-X293T są zatem szeroko stosowane do wytwarzania wektorów lentiwirusowych trzeciej generacji w zastosowaniach związanych z dostarczaniem genów, edycją genów i inżynierią stabilnych linii komórkowych.
Komórki Lenti-X293T zachowują ogólną użyteczność systemów pochodnych HEK293 do badań nad ekspresją białek rekombinowanych na wysokim poziomie i przejściową ekspresją genów. Ich stabilne właściwości wzrostowe i powtarzalna wydajność sprawiają, że nadają się one zarówno do zastosowań badawczych na małą skalę, jak i do skalowalnych ustawień produkcyjnych, pod warunkiem przestrzegania standardowych wytycznych dotyczących bezpieczeństwa biologicznego i pakowania wektorów dla systemów lentiwirusowych.
- Chusteczka
- Nerka embrionalna
- Choroba
- Przekształcona linia komórkowa (komórki HEK przekształcone DNA adenowirusa typu 5)
- Zastosowania
- Produkcja wektorów lentiwirusowych; transfekcja przejściowa; ekspresja białek rekombinowanych na wysokim poziomie; pakowanie wirusów
- Synonimy
- Lenti-X 293T
- 293T
- HEK 293T
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Kobieta
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- GMO
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 2
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
- Typ komórki
- Embrionalne komórki nabłonkowe nerki
- Nowotworotwórczy
- nowotworowy u myszy z obniżoną odpornością (dla 293T)
- Status ploidii
- Aneuploid, hipotriploid (zgłoszony dla 293T)
- Karyotyp
- Aneuploidalny kariotyp człowieka z wieloma nieprawidłowościami chromosomowymi (typowymi dla 293T)
- Czas podwojenia
- 20–24 godziny
04Identyfikatory
- Źródło
- Lenti-X293T (numer katalogowy Cytion 305820)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063 (parental 293T)
05Ekspresja i podatność
- Ekspresja białek
- Antygen T wirusa SV40
- Ekspresja antygenu
- Antygen T wirusa SV40
- Onkogeny
- Antygen T wirusa SV40
- Profil mutacji
- Nie w pełni scharakteryzowany; zawiera zintegrowany adenowirus 5 DNA i konstrukt dużego antygenu T SV40.
- Wirusy
- Zawiera DNA adenowirusa typu 5; wyraża duży antygen T wirusa SV40.
- Podatność na wirusy
- Wysoka tolerancja na produkcję lentiwirusów
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Rozdzielić przed osiągnięciem pełnego połączenia; po rozmrożeniu odczekać do 48 godzin, aby uzyskać pełne połączenie.
- Współczynnik podziału
- Zalecany stosunek wynosi od 1:5 do 1:10.
- Gęstość wysiewu
- 2 do 4 x 104 komórek/cm2
- Odnawianie płynów
- Co 2-3 dni
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- Płód
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak