
- Vävnad
- Embryonal njure
- Sjukdom
- Transformerad cellinje (adenovirus typ 5 DNA-transformerade HEK-celler)
- Synonymer
- Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T
Dokument
Lenti-X293T
Cell line · Produktnummer 305820
Lenti-X293T-celler är en avart av den humana embryonala njurcellslinjen 293T, som har modifierats och optimerats specifikt för högeffektiva lentivirala vektorer...
Anpassning / Rekommendationer
- Lenti-X293TCell line€550.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
Lenti-X293T-celler är ett derivat av den humana embryonala njurlinjen 293T, konstruerade och optimerade specifikt för högeffektiv lentiviral vektorproduktion. Liksom de ursprungliga 293T-cellerna uttrycker de stabilt SV40-antigenet, vilket möjliggör episomal replikation av plasmider som innehåller SV40-replikationsursprunget och avsevärt förbättrar den transienta transfektionseffektiviteten. Lenti-X293T-celler uppvisar en adherent epitelial morfologi och robusta tillväxtkaraktäristika under standardiserade odlingsförhållanden med serumtillsats, vilket stödjer högdensitetsodlingar som är lämpliga för storskaliga virusproduktionsarbetsflöden.
Denna cellinje har valts ut för sin överlägsna transfektionsprestanda med kalciumfosfat-, lipid- eller polymerbaserade reagenser, vilket resulterar i konsekvent förhöjda lentivirala titrar jämfört med konventionella HEK293T-populationer. Den förbättrade virusproduktionen tillskrivs optimerad cellfysiologi som stödjer effektiv plasmidupptagning, stark transgenuttryck och effektiv sammansättning och frisättning av replikationsinkompetenta lentivirala partiklar vid co-transfektion med lämpliga förpacknings- och höljekonstruktioner. Lenti-X293T-celler används därför i stor utsträckning för generering av tredje generationens lentivirala vektorer inom genleverans, genredigering och stabila cellinjeingenjörstillämpningar.
Lenti-X293T-celler behåller den allmänna användbarheten hos HEK293-härledda system för högnivåexpression av rekombinant protein och studier av transient genuttryck. Deras stabila tillväxtegenskaper och reproducerbara prestanda gör dem lämpliga för både småskaliga forskningsapplikationer och skalbara produktionsmiljöer, förutsatt att standardriktlinjer för biosäkerhet och vektorförpackning följs för lentivirala system.
- Vävnad
- Embryonal njure
- Sjukdom
- Transformerad cellinje (adenovirus typ 5 DNA-transformerade HEK-celler)
- Ansökningar
- Lentiviral vektorproduktion; transient transfektion; högnivå rekombinant proteinexpression; virusförpackning
- Synonymer
- Lenti-X 293T
- 293T
- HEK 293T
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Kvinna
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- GMO-status
- GMO
- Detaljer om GMO-status
- GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
- Biosäkerhetsnivå
- 2
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelliknande
- Celltyp
- Embryonala njurens epitelceller
- Tumörframkallande
- tumörframkallande hos immunförsvarssvaga möss (för 293T)
- Ploidistatus
- Aneuploid, hypotriploid (rapporterat för 293T)
- Karyotyp
- Aneuploid mänsklig karyotyp med flera kromosomavvikelser (typiskt för 293T)
- Fördubblingstid
- 20–24 timmar
04Identifierare
- Källa
- Lenti-X293T (Cytion katalognummer 305820)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063 (parental 293T)
05Uttryck och mottaglighet
- Proteinexpression
- SV40 stort T-antigen
- Antigenuttryck
- SV40 stort T-antigen
- Onkogener
- SV40 stort T-antigen
- Mutationsprofil
- Inte fullständigt karakteriserad; innehåller integrerat adenovirus 5-DNA och SV40 stort T-antigenkonstrukt.
- Virus
- Innehåller adenovirus typ 5-DNA; uttrycker SV40 stort T-antigen
- Virusmottaglighet
- Mycket tillåtande för lentiviral produktion
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% FBS
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- Dela innan fullständig sammanflöde uppnås; vänta upp till 48 timmar för fullständig fastsättning efter upptining.
- Uppdelningsförhållande
- Ett förhållande på 1:5 till 1:10 rekommenderas.
- Såtäthet
- 2 till 4 x 104 celler/cm2
- Vätskeförnyelse
- Varannan eller var tredje dag
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Frysmedel
- Som kryopreserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Donatorns ålder
- Foster
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja