Gå direkt till innehållet
Lenti-X293T
Vävnad
Embryonal njure
Sjukdom
Transformerad cellinje (adenovirus typ 5 DNA-transformerade HEK-celler)
Synonymer
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Lenti-X293T

Cell line · Produktnummer 305820

Lenti-X293T-celler är en avart av den humana embryonala njurcellslinjen 293T, som har modifierats och optimerats specifikt för högeffektiva lentivirala vektorer...

€550.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Lenti-X293T-celler är ett derivat av den humana embryonala njurlinjen 293T, konstruerade och optimerade specifikt för högeffektiv lentiviral vektorproduktion. Liksom de ursprungliga 293T-cellerna uttrycker de stabilt SV40-antigenet, vilket möjliggör episomal replikation av plasmider som innehåller SV40-replikationsursprunget och avsevärt förbättrar den transienta transfektionseffektiviteten. Lenti-X293T-celler uppvisar en adherent epitelial morfologi och robusta tillväxtkaraktäristika under standardiserade odlingsförhållanden med serumtillsats, vilket stödjer högdensitetsodlingar som är lämpliga för storskaliga virusproduktionsarbetsflöden.

Denna cellinje har valts ut för sin överlägsna transfektionsprestanda med kalciumfosfat-, lipid- eller polymerbaserade reagenser, vilket resulterar i konsekvent förhöjda lentivirala titrar jämfört med konventionella HEK293T-populationer. Den förbättrade virusproduktionen tillskrivs optimerad cellfysiologi som stödjer effektiv plasmidupptagning, stark transgenuttryck och effektiv sammansättning och frisättning av replikationsinkompetenta lentivirala partiklar vid co-transfektion med lämpliga förpacknings- och höljekonstruktioner. Lenti-X293T-celler används därför i stor utsträckning för generering av tredje generationens lentivirala vektorer inom genleverans, genredigering och stabila cellinjeingenjörstillämpningar.

Lenti-X293T-celler behåller den allmänna användbarheten hos HEK293-härledda system för högnivåexpression av rekombinant protein och studier av transient genuttryck. Deras stabila tillväxtegenskaper och reproducerbara prestanda gör dem lämpliga för både småskaliga forskningsapplikationer och skalbara produktionsmiljöer, förutsatt att standardriktlinjer för biosäkerhet och vektorförpackning följs för lentivirala system.

Vävnad
Embryonal njure
Sjukdom
Transformerad cellinje (adenovirus typ 5 DNA-transformerade HEK-celler)
Ansökningar
Lentiviral vektorproduktion; transient transfektion; högnivå rekombinant proteinexpression; virusförpackning
Synonymer
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO
Detaljer om GMO-status
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Biosäkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Celltyp
Embryonala njurens epitelceller
Tumörframkallande
tumörframkallande hos immunförsvarssvaga möss (för 293T)
Ploidistatus
Aneuploid, hypotriploid (rapporterat för 293T)
Karyotyp
Aneuploid mänsklig karyotyp med flera kromosomavvikelser (typiskt för 293T)
Fördubblingstid
20–24 timmar

04Identifierare

Källa
Lenti-X293T (Cytion katalognummer 305820)
NCBI-skattenummer
9606

05Uttryck och mottaglighet

Proteinexpression
SV40 stort T-antigen
Antigenuttryck
SV40 stort T-antigen
Onkogener
SV40 stort T-antigen
Mutationsprofil
Inte fullständigt karakteriserad; innehåller integrerat adenovirus 5-DNA och SV40 stort T-antigenkonstrukt.
Virus
Innehåller adenovirus typ 5-DNA; uttrycker SV40 stort T-antigen
Virusmottaglighet
Mycket tillåtande för lentiviral produktion

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Dela innan fullständig sammanflöde uppnås; vänta upp till 48 timmar för fullständig fastsättning efter upptining.
Uppdelningsförhållande
Ett förhållande på 1:5 till 1:10 rekommenderas.
Såtäthet
2 till 4 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
Varannan eller var tredje dag
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Frysmedel
Som kryopreserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
Foster