Přejít na obsah
Lenti-X293T
Tkáň
Embryonální ledvina
Nemoc
Transformovaná buněčná linie (HEK buňky transformované DNA adenoviru typu 5)
Synonyma
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Dokumenty

Lenti-X293T

Cell line · Číslo výrobku 305820

Buňky Lenti-X293T jsou odvozeny z linie lidských embryonálních ledvinových buněk 293T a byly geneticky upraveny a optimalizovány speciálně pro vysoce účinný lentivirový vektor...

€550.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky Lenti-X293T jsou derivátem lidské embryonální ledviny 293T, které byly speciálně upraveny a optimalizovány pro vysoce účinnou produkci lentivirových vektorů. Stejně jako mateřské buňky 293T stabilně exprimují velký T antigen SV40, který umožňuje epizomální replikaci plazmidů obsahujících replikační původ SV40 a významně zvyšuje účinnost přechodné transfekce. Buňky Lenti-X293T vykazují adhezivní epiteliální morfologii a robustní růstové charakteristiky ve standardních kultivačních podmínkách doplněných sérem, což podporuje kultivace s vysokou hustotou vhodné pro velkokapacitní pracovní postupy virové produkce.

Tato buněčná linie byla vybrána pro vynikající transfekční výkonnost při použití činidel na bázi fosforečnanu vápenatého, lipidů nebo polymerů, což vede k trvale zvýšeným titrům lentiviru ve srovnání s konvenčními populacemi HEK293T. Zvýšený virový výstup je přičítán optimalizované buněčné fyziologii, která podporuje účinný příjem plazmidu, silnou expresi transgenu a efektivní sestavení a uvolnění replikačně nekompetentních lentivirových částic při společné transfekci s vhodnými balicími a obalovými konstrukty. Buňky Lenti-X293T jsou proto široce používány pro generování lentivirových vektorů třetí generace v aplikacích pro dodávání genů, úpravu genů a inženýrství stabilních buněčných linií.

Buňky Lenti-X293T si zachovávají obecnou užitečnost systémů odvozených od HEK293 pro studium exprese rekombinantních proteinů na vysoké úrovni a přechodné genové exprese. Díky svým stabilním růstovým charakteristikám a reprodukovatelnému výkonu jsou vhodné jak pro výzkumné aplikace v malém měřítku, tak pro škálovatelné výrobní prostředí, za předpokladu, že jsou dodržovány standardní pokyny pro biologickou bezpečnost a balení vektorů pro lentivirální systémy.

Tkáň
Embryonální ledvina
Nemoc
Transformovaná buněčná linie (HEK buňky transformované DNA adenoviru typu 5)
Aplikace
Produkce lentivirového vektoru; přechodná transfekce; vysoká úroveň exprese rekombinantního proteinu; balení viru
Synonyma
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO
Podrobnosti o statusu GMO
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Embryonální epiteliální buňky ledvin
Tumorogenní
tumorigenní u imunokompromitovaných myší (pro 293T)
Ploidní stav
Aneuploidní, hypotriploidní (hlášeno pro 293T)
Karyotyp
Aneuploidní lidský karyotyp s vícečetnými chromozomálními abnormalitami (typický pro 293T)
Doba zdvojnásobení
20–24 hodin

04Identifikátory

Citace
Lenti-X293T (katalogové číslo Cytion 305820)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
SV40 velký T antigen
Exprese antigenu
SV40 velký T antigen
Onkogeny
SV40 velký T antigen
Mutační profil
Není plně charakterizován; obsahuje integrovanou DNA adenoviru 5 a konstrukt velkého T antigenu SV40.
Viry
Obsahuje DNA adenoviru typu 5; exprimuje velký T antigen SV40.
Náchylnost k virům
Vysoce tolerantní pro produkci lentivirových vektorů

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Rozdělte před dosažením úplného spojení; po rozmrazení počkejte až 48 hodin, než dojde k úplnému připojení.
Poměr rozdělení
Doporučuje se poměr 1:5 až 1:10.
Hustota výsevu
2 až 4 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
Každé 2–3 dny
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Plod