
- Tkáň
- Embryonální ledvina
- Nemoc
- Transformovaná buněčná linie (HEK buňky transformované DNA adenoviru typu 5)
- Synonyma
- Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T
Dokumenty
Lenti-X293T
Cell line · Číslo výrobku 305820
Buňky Lenti-X293T jsou odvozeny z linie lidských embryonálních ledvinových buněk 293T a byly geneticky upraveny a optimalizovány speciálně pro vysoce účinný lentivirový vektor...
Přizpůsobení / Doporučení
- Lenti-X293TCell line€550.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
Buňky Lenti-X293T jsou derivátem lidské embryonální ledviny 293T, které byly speciálně upraveny a optimalizovány pro vysoce účinnou produkci lentivirových vektorů. Stejně jako mateřské buňky 293T stabilně exprimují velký T antigen SV40, který umožňuje epizomální replikaci plazmidů obsahujících replikační původ SV40 a významně zvyšuje účinnost přechodné transfekce. Buňky Lenti-X293T vykazují adhezivní epiteliální morfologii a robustní růstové charakteristiky ve standardních kultivačních podmínkách doplněných sérem, což podporuje kultivace s vysokou hustotou vhodné pro velkokapacitní pracovní postupy virové produkce.
Tato buněčná linie byla vybrána pro vynikající transfekční výkonnost při použití činidel na bázi fosforečnanu vápenatého, lipidů nebo polymerů, což vede k trvale zvýšeným titrům lentiviru ve srovnání s konvenčními populacemi HEK293T. Zvýšený virový výstup je přičítán optimalizované buněčné fyziologii, která podporuje účinný příjem plazmidu, silnou expresi transgenu a efektivní sestavení a uvolnění replikačně nekompetentních lentivirových částic při společné transfekci s vhodnými balicími a obalovými konstrukty. Buňky Lenti-X293T jsou proto široce používány pro generování lentivirových vektorů třetí generace v aplikacích pro dodávání genů, úpravu genů a inženýrství stabilních buněčných linií.
Buňky Lenti-X293T si zachovávají obecnou užitečnost systémů odvozených od HEK293 pro studium exprese rekombinantních proteinů na vysoké úrovni a přechodné genové exprese. Díky svým stabilním růstovým charakteristikám a reprodukovatelnému výkonu jsou vhodné jak pro výzkumné aplikace v malém měřítku, tak pro škálovatelné výrobní prostředí, za předpokladu, že jsou dodržovány standardní pokyny pro biologickou bezpečnost a balení vektorů pro lentivirální systémy.
- Tkáň
- Embryonální ledvina
- Nemoc
- Transformovaná buněčná linie (HEK buňky transformované DNA adenoviru typu 5)
- Aplikace
- Produkce lentivirového vektoru; přechodná transfekce; vysoká úroveň exprese rekombinantního proteinu; balení viru
- Synonyma
- Lenti-X 293T
- 293T
- HEK 293T
02Klasifikace
- Organismus
- Člověk
- Sex
- Žena
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Stav GMO
- GMO
- Podrobnosti o statusu GMO
- GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 2
03Charakteristika
- Morfologie
- Epitelu podobné
- Typ buňky
- Embryonální epiteliální buňky ledvin
- Tumorogenní
- tumorigenní u imunokompromitovaných myší (pro 293T)
- Ploidní stav
- Aneuploidní, hypotriploidní (hlášeno pro 293T)
- Karyotyp
- Aneuploidní lidský karyotyp s vícečetnými chromozomálními abnormalitami (typický pro 293T)
- Doba zdvojnásobení
- 20–24 hodin
04Identifikátory
- Citace
- Lenti-X293T (katalogové číslo Cytion 305820)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063 (parental 293T)
05Exprese a náchylnost
- Exprese proteinů
- SV40 velký T antigen
- Exprese antigenu
- SV40 velký T antigen
- Onkogeny
- SV40 velký T antigen
- Mutační profil
- Není plně charakterizován; obsahuje integrovanou DNA adenoviru 5 a konstrukt velkého T antigenu SV40.
- Viry
- Obsahuje DNA adenoviru typu 5; exprimuje velký T antigen SV40.
- Náchylnost k virům
- Vysoce tolerantní pro produkci lentivirových vektorů
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Rozdělte před dosažením úplného spojení; po rozmrazení počkejte až 48 hodin, než dojde k úplnému připojení.
- Poměr rozdělení
- Doporučuje se poměr 1:5 až 1:10.
- Hustota výsevu
- 2 až 4 x 104 buněk/cm2
- Obnova tekutin
- Každé 2–3 dny
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Věk dárce
- Plod
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano