
- Kude
- Embrüonaalne neer
- Haigus
- Transformeeritud rakuliin (adenoviiruse tüüp 5 DNA-ga transformeeritud HEK-rakud)
- Sünonüümid
- Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T
Dokumendid
Lenti-X293T
Cell line · Toote number 305820
Lenti-X293T-rakud on inimese embrüonaalse neeru 293T-rakuliini derivaat, mis on spetsiaalselt välja töötatud ja optimeeritud kõrge efektiivsusega lentiviirusvektori jaoks...
Kohandamine / Soovitused
- Lenti-X293TCell line€550.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
Lenti-X293T rakud on inimese embrüonaalse neeru 293T liini derivaat, mis on spetsiaalselt loodud ja optimeeritud kõrge efektiivsusega lentiviirusvektori tootmiseks. Nagu vanemad 293T rakud, ekspresseerivad need stabiilselt SV40 suure T-antigeeni, mis võimaldab SV40 replikatsiooni alguspunkti sisaldavate plasmiidide episomaalset replikatsiooni ja parandab oluliselt ajutise transfektsiooni efektiivsust. Lenti-X293T rakud näitavad standardse seerumiga täiendatud kultiveerimistingimustes adheseeruvat epiteelמורfoloogiat ja tugevaid kasvunäitajaid, toetades suure tihedusega kultuure, mis sobivad suuremahuliste viirusetootmise töövoogudega.
See rakuliin on valitud kaltsiumfosfaadi, lipiidipõhiste või polümeeripõhiste reagentide kasutamisel ülimaks transfektsioonitulemuseks, mille tulemuseks on tavapäraste HEK293T populatsioonidega võrreldes järjepidevalt kõrgemad lentiviiruse tiitrid. Suurenenud viiruslik tootlikkus on tingitud optimeeritud rakufüsioloogiast, mis toetab efektiivset plasmiidi omastamist, tugevat transgeeni ekspressiooni ning replikatsioonivõimetute lentiviirusosakeste efektiivset kokkupanekut ja vabanemist, kui need on ko-transfekteeritud sobivate pakendamis- ja ümbriskonstruktsioonidega. Lenti-X293T rakke kasutatakse seetõttu laialdaselt kolmanda põlvkonna lentiviirusvektorite genereerimiseks geenide edastamisel, geenide redigeerimisel ja stabiilsete rakuliinide insenerite rakendustes.
Lenti-X293T rakud säilitavad HEK293-põhiste süsteemide üldise kasulikkuse kõrgetasemelise rekombinantse valgu ekspressiooni ja ajutise geeniekspressiooni uuringutes. Nende stabiilsed kasvunäitajad ja reprodutseeritav toimivus muudavad need sobivaks nii väikesemahulisteks uurimistöödeks kui ka mastaapseteks tootmiskeskkondadeks, tingimusel et järgitakse lentiviirussüsteemide standardseid bioloogilise ohutuse ja vektori pakendamise juhiseid.
- Kude
- Embrüonaalne neer
- Haigus
- Transformeeritud rakuliin (adenoviiruse tüüp 5 DNA-ga transformeeritud HEK-rakud)
- Rakendused
- Lentiviiruse vektori tootmine; ajutine transfektsioon; kõrgetasemeline rekombinantse valgu ekspressioon; viiruse pakendamine
- Sünonüümid
- Lenti-X 293T
- 293T
- HEK 293T
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Järgija
- GMO-staatus
- GMO
- GMO-staatuse üksikasjad
- GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
- Bioloogilise ohutuse tase
- 2
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteelilaadsed
- Rakutüüp
- Embrüonaalsed neeru epiteelirakud
- Tuumorigeenne
- tuumorigeenne immuunpuudulikkusega hiirtel (293T jaoks)
- Ploidsus
- Aneuploid, hüpotriploid (teatatud 293T puhul)
- Karyotüüp
- Aneuploidne inimese kariootüüp mitmete kromosoomianomaaliatega (tüüpiline 293T-le)
- Kahekordistumisaeg
- 20–24 tundi
04Tunnused
- Viide
- Lenti-X293T (Cytioni katalooginumber 305820)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063 (parental 293T)
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Valgu ekspressioon
- SV40 suur T-antigeen
- Antigeeni ekspressioon
- SV40 suur T-antigeen
- Onkogeenid
- SV40 suur T-antigeen
- Mutatsiooniprofiil
- Ei ole täielikult iseloomustatud; sisaldab integreeritud adenoviiruse 5 DNA-d ja SV40 suure T-antigeeni konstruktsiooni.
- Viirused
- Sisaldab adenoviiruse tüübi 5 DNA-d; ekspresseerib SV40 suure T-antigeeni.
- Viirusele vastuvõtlikkus
- Väga soodne lentiviiruse tootmiseks
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Jagage enne täieliku ühinemise saavutamist; pärast sulatamist võib täieliku ühinemise saavutamine võtta aega kuni 48 tundi.
- Jagamissuhe
- Soovitatav suhe on 1:5 kuni 1:10.
- Külvitihedus
- 2 kuni 4 x 104 rakku/cm2
- Vedeliku vahetus
- Iga 2–3 päeva tagant
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Doonori vanus
- Loote
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah