Mine otse sisu juurde
Lenti-X293T
Kude
Embrüonaalne neer
Haigus
Transformeeritud rakuliin (adenoviiruse tüüp 5 DNA-ga transformeeritud HEK-rakud)
Sünonüümid
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Dokumendid

Lenti-X293T

Cell line · Toote number 305820

Lenti-X293T-rakud on inimese embrüonaalse neeru 293T-rakuliini derivaat, mis on spetsiaalselt välja töötatud ja optimeeritud kõrge efektiivsusega lentiviirusvektori jaoks...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Lenti-X293T rakud on inimese embrüonaalse neeru 293T liini derivaat, mis on spetsiaalselt loodud ja optimeeritud kõrge efektiivsusega lentiviirusvektori tootmiseks. Nagu vanemad 293T rakud, ekspresseerivad need stabiilselt SV40 suure T-antigeeni, mis võimaldab SV40 replikatsiooni alguspunkti sisaldavate plasmiidide episomaalset replikatsiooni ja parandab oluliselt ajutise transfektsiooni efektiivsust. Lenti-X293T rakud näitavad standardse seerumiga täiendatud kultiveerimistingimustes adheseeruvat epiteelמורfoloogiat ja tugevaid kasvunäitajaid, toetades suure tihedusega kultuure, mis sobivad suuremahuliste viirusetootmise töövoogudega.

See rakuliin on valitud kaltsiumfosfaadi, lipiidipõhiste või polümeeripõhiste reagentide kasutamisel ülimaks transfektsioonitulemuseks, mille tulemuseks on tavapäraste HEK293T populatsioonidega võrreldes järjepidevalt kõrgemad lentiviiruse tiitrid. Suurenenud viiruslik tootlikkus on tingitud optimeeritud rakufüsioloogiast, mis toetab efektiivset plasmiidi omastamist, tugevat transgeeni ekspressiooni ning replikatsioonivõimetute lentiviirusosakeste efektiivset kokkupanekut ja vabanemist, kui need on ko-transfekteeritud sobivate pakendamis- ja ümbriskonstruktsioonidega. Lenti-X293T rakke kasutatakse seetõttu laialdaselt kolmanda põlvkonna lentiviirusvektorite genereerimiseks geenide edastamisel, geenide redigeerimisel ja stabiilsete rakuliinide insenerite rakendustes.

Lenti-X293T rakud säilitavad HEK293-põhiste süsteemide üldise kasulikkuse kõrgetasemelise rekombinantse valgu ekspressiooni ja ajutise geeniekspressiooni uuringutes. Nende stabiilsed kasvunäitajad ja reprodutseeritav toimivus muudavad need sobivaks nii väikesemahulisteks uurimistöödeks kui ka mastaapseteks tootmiskeskkondadeks, tingimusel et järgitakse lentiviirussüsteemide standardseid bioloogilise ohutuse ja vektori pakendamise juhiseid.

Kude
Embrüonaalne neer
Haigus
Transformeeritud rakuliin (adenoviiruse tüüp 5 DNA-ga transformeeritud HEK-rakud)
Rakendused
Lentiviiruse vektori tootmine; ajutine transfektsioon; kõrgetasemeline rekombinantse valgu ekspressioon; viiruse pakendamine
Sünonüümid
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO
GMO-staatuse üksikasjad
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Embrüonaalsed neeru epiteelirakud
Tuumorigeenne
tuumorigeenne immuunpuudulikkusega hiirtel (293T jaoks)
Ploidsus
Aneuploid, hüpotriploid (teatatud 293T puhul)
Karyotüüp
Aneuploidne inimese kariootüüp mitmete kromosoomianomaaliatega (tüüpiline 293T-le)
Kahekordistumisaeg
20–24 tundi

04Tunnused

Viide
Lenti-X293T (Cytioni katalooginumber 305820)
NCBI maksukood
9606

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
SV40 suur T-antigeen
Antigeeni ekspressioon
SV40 suur T-antigeen
Onkogeenid
SV40 suur T-antigeen
Mutatsiooniprofiil
Ei ole täielikult iseloomustatud; sisaldab integreeritud adenoviiruse 5 DNA-d ja SV40 suure T-antigeeni konstruktsiooni.
Viirused
Sisaldab adenoviiruse tüübi 5 DNA-d; ekspresseerib SV40 suure T-antigeeni.
Viirusele vastuvõtlikkus
Väga soodne lentiviiruse tootmiseks

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Jagage enne täieliku ühinemise saavutamist; pärast sulatamist võib täieliku ühinemise saavutamine võtta aega kuni 48 tundi.
Jagamissuhe
Soovitatav suhe on 1:5 kuni 1:10.
Külvitihedus
2 kuni 4 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
Iga 2–3 päeva tagant
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Loote