Skip to content
Lenti-X293T
Tissue
כליה עוברת
Disease
קו תאים שעבר שינוי (תאי HEK שעברו שינוי DNA מסוג אדנווירוס 5)
Synonyms
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Documents

Lenti-X293T

Cell line · Product number 305820

Lenti-X293T cells are a derivative of the human embryonic kidney 293T lineage, engineered and optimized specifically for high-efficiency lentiviral vector...

US$550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

תאי Lenti-X293T הם נגזרת של שושלת 293T של כליה עוברית אנושית, שהונדסה ואופטימיזציה במיוחד לייצור וקטור לנטוירוס בעל יעילות גבוהה. כמו תאי 293T ההוריים, הם מבטאים באופן יציב את האנטיגן T הגדול SV40, המאפשר שכפול אפיזומלי של פלסמידים המכילים את מקור השכפול SV40 ומשפר באופן משמעותי את יעילות הטרנספקציה הזמנית. תאי Lenti-X293T מציגים מורפולוגיה אפיתלית דבוקה ומאפייני צמיחה חזקים בתנאי תרבית סטנדרטיים בתוספת סרום, התומכים בתרבויות בצפיפות גבוהה המתאימות לתהליכי ייצור נגיפים בקנה מידה גדול.

קו תאים זה נבחר בשל ביצועי טרנספקציה מעולים באמצעות ריאגנטים מבוססי סידן פוספט, ליפידים או פולימרים, מה שמביא לטיטרים לנטרווירוסים גבוהים באופן עקבי בהשוואה לאוכלוסיות HEK293T קונבנציונליות. התפוקה הוויראלית המשופרת מיוחסת לפיזיולוגיה תאית מיטבית התומכת בקליטה יעילה של פלסמיד, ביטוי חזק של טרנסגנים והרכבה ושחרור יעילים של חלקיקים לנטוירוסים שאינם מסוגלים לשכפול כאשר הם מועברים יחד עם מבנים מתאימים של אריזה ומעטפת. תאי Lenti-X293T משמשים אפוא באופן נרחב ליצירת וקטורים לנטוירוסים מהדור השלישי ביישומים של העברת גנים, עריכת גנים והנדסת קווי תאים יציבים.

תאי Lenti-X293T שומרים על השימושיות הכללית של מערכות הנגזרות מ-HEK293 לביטוי חלבונים רקומביננטיים ברמה גבוהה ולמחקרים על ביטוי גנים זמני. מאפייני הצמיחה היציבים שלהם והביצועים הניתנים לשחזור הופכים אותם למתאימים הן ליישומים מחקריים בקנה מידה קטן והן להגדרות ייצור הניתנות להרחבה, בתנאי שמקפידים על הנחיות בטיחות ביולוגית ואריזת וקטורים סטנדרטיות עבור מערכות לנטיויראליות.

Tissue
כליה עוברת
Disease
קו תאים שעבר שינוי (תאי HEK שעברו שינוי DNA מסוג אדנווירוס 5)
Applications
ייצור וקטור לנטי-ויראלי; טרנספקציה זמנית; ביטוי חלבון רקומביננטי ברמה גבוהה; אריזת נגיפים
Synonyms
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO
GMO status details
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
תאי אפיתל של כליה עוברת
Tumourigenic
מגרה גידולים בעכברים עם מערכת חיסונית מוחלשת (עבור 293T)
Ploidy status
אנאופלואידי, היפותריפלואידי (דווח עבור 293T)
Karyotype
קריוטיפ אנושי אנאופלואידי עם מספר רב של חריגות כרומוזומליות (אופייני ל-293T)
Doubling time
20-24 שעות

04Identifiers

Citation
Lenti-X293T (מספר קטלוגי Cytion 305820)
NCBI TaxID
9606

05Expression and susceptibility

Protein expression
אנטיגן T גדול SV40
Antigen expression
אנטיגן T גדול SV40
Oncogenes
אנטיגן T גדול SV40
Mutational profile
לא מאופיין במלואו; מכיל DNA משולב של אדנו-וירוס 5 ומבנה אנטיגן T גדול SV40.
Viruses
מכיל DNA מסוג אדנווירוס 5; מבטא אנטיגן T גדול SV40
Virus susceptibility
מאוד מתירני לייצור לנטירווירוס

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
להפריד לפני השלמת ההיתוך; להמתין עד 48 שעות להיתוך מלא לאחר ההפשרה.
Split ratio
מומלץ להשתמש ביחס של 1:5 עד 1:10.
Seeding density
2 עד 4 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
כל 2-3 ימים
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
עובר