
- Tissue
- כליה עוברת
- Disease
- קו תאים שעבר שינוי (תאי HEK שעברו שינוי DNA מסוג אדנווירוס 5)
- Synonyms
- Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T
Documents
Lenti-X293T
Cell line · Product number 305820
Lenti-X293T cells are a derivative of the human embryonic kidney 293T lineage, engineered and optimized specifically for high-efficiency lentiviral vector...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
תאי Lenti-X293T הם נגזרת של שושלת 293T של כליה עוברית אנושית, שהונדסה ואופטימיזציה במיוחד לייצור וקטור לנטוירוס בעל יעילות גבוהה. כמו תאי 293T ההוריים, הם מבטאים באופן יציב את האנטיגן T הגדול SV40, המאפשר שכפול אפיזומלי של פלסמידים המכילים את מקור השכפול SV40 ומשפר באופן משמעותי את יעילות הטרנספקציה הזמנית. תאי Lenti-X293T מציגים מורפולוגיה אפיתלית דבוקה ומאפייני צמיחה חזקים בתנאי תרבית סטנדרטיים בתוספת סרום, התומכים בתרבויות בצפיפות גבוהה המתאימות לתהליכי ייצור נגיפים בקנה מידה גדול.
קו תאים זה נבחר בשל ביצועי טרנספקציה מעולים באמצעות ריאגנטים מבוססי סידן פוספט, ליפידים או פולימרים, מה שמביא לטיטרים לנטרווירוסים גבוהים באופן עקבי בהשוואה לאוכלוסיות HEK293T קונבנציונליות. התפוקה הוויראלית המשופרת מיוחסת לפיזיולוגיה תאית מיטבית התומכת בקליטה יעילה של פלסמיד, ביטוי חזק של טרנסגנים והרכבה ושחרור יעילים של חלקיקים לנטוירוסים שאינם מסוגלים לשכפול כאשר הם מועברים יחד עם מבנים מתאימים של אריזה ומעטפת. תאי Lenti-X293T משמשים אפוא באופן נרחב ליצירת וקטורים לנטוירוסים מהדור השלישי ביישומים של העברת גנים, עריכת גנים והנדסת קווי תאים יציבים.
תאי Lenti-X293T שומרים על השימושיות הכללית של מערכות הנגזרות מ-HEK293 לביטוי חלבונים רקומביננטיים ברמה גבוהה ולמחקרים על ביטוי גנים זמני. מאפייני הצמיחה היציבים שלהם והביצועים הניתנים לשחזור הופכים אותם למתאימים הן ליישומים מחקריים בקנה מידה קטן והן להגדרות ייצור הניתנות להרחבה, בתנאי שמקפידים על הנחיות בטיחות ביולוגית ואריזת וקטורים סטנדרטיות עבור מערכות לנטיויראליות.
- Tissue
- כליה עוברת
- Disease
- קו תאים שעבר שינוי (תאי HEK שעברו שינוי DNA מסוג אדנווירוס 5)
- Applications
- ייצור וקטור לנטי-ויראלי; טרנספקציה זמנית; ביטוי חלבון רקומביננטי ברמה גבוהה; אריזת נגיפים
- Synonyms
- Lenti-X 293T
- 293T
- HEK 293T
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO
- GMO status details
- GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Cell type
- תאי אפיתל של כליה עוברת
- Tumourigenic
- מגרה גידולים בעכברים עם מערכת חיסונית מוחלשת (עבור 293T)
- Ploidy status
- אנאופלואידי, היפותריפלואידי (דווח עבור 293T)
- Karyotype
- קריוטיפ אנושי אנאופלואידי עם מספר רב של חריגות כרומוזומליות (אופייני ל-293T)
- Doubling time
- 20-24 שעות
04Identifiers
- Citation
- Lenti-X293T (מספר קטלוגי Cytion 305820)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063 (parental 293T)
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- אנטיגן T גדול SV40
- Antigen expression
- אנטיגן T גדול SV40
- Oncogenes
- אנטיגן T גדול SV40
- Mutational profile
- לא מאופיין במלואו; מכיל DNA משולב של אדנו-וירוס 5 ומבנה אנטיגן T גדול SV40.
- Viruses
- מכיל DNA מסוג אדנווירוס 5; מבטא אנטיגן T גדול SV40
- Virus susceptibility
- מאוד מתירני לייצור לנטירווירוס
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- להפריד לפני השלמת ההיתוך; להמתין עד 48 שעות להיתוך מלא לאחר ההפשרה.
- Split ratio
- מומלץ להשתמש ביחס של 1:5 עד 1:10.
- Seeding density
- 2 עד 4 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- כל 2-3 ימים
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- עובר
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes