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Lenti-X293T
Pañuelo de papel
Riñón embrionario
Enfermedad
Línea celular transformada (células HEK transformadas con ADN de adenovirus tipo 5)
Sinónimos
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Documentos

Lenti-X293T

Cell line · Número de producto 305820

Las células Lenti-X293T son un derivado del linaje renal embrionario humano 293T, modificadas y optimizadas específicamente para vectores lentivirales de alta eficiencia...

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01Información general

Descripción

Las células Lenti-X293T son un derivado del linaje renal embrionario humano 293T, diseñado y optimizado específicamente para la producción de vectores lentivirales de alta eficiencia. Al igual que las células parentales 293T, expresan de forma estable el antígeno T grande del SV40, lo que permite la replicación episomal de plásmidos que contienen el origen de replicación del SV40 y mejora significativamente la eficiencia de la transfección transitoria. Las células Lenti-X293T presentan una morfología epitelial adherente y características de crecimiento robustas en condiciones de cultivo estándar suplementadas con suero, lo que permite cultivos de alta densidad adecuados para flujos de trabajo de producción viral a gran escala.

Esta línea celular ha sido seleccionada por su rendimiento superior en la transfección con reactivos a base de fosfato cálcico, lípidos o polímeros, lo que da como resultado títulos lentivirales consistentemente elevados en comparación con las poblaciones HEK293T convencionales. El aumento de la producción viral se atribuye a la fisiología celular optimizada que favorece la absorción eficiente de plásmidos, la expresión fuerte de transgenes y el ensamblaje y la liberación eficaces de partículas lentivirales incompetentes para la replicación cuando se cotransfeccionan con construcciones de envoltura y empaquetamiento adecuadas. Por lo tanto, las células Lenti-X293T se utilizan ampliamente para la generación de vectores lentivirales de tercera generación en aplicaciones de administración de genes, edición de genes e ingeniería de líneas celulares estables.

Las células Lenti-X293T mantienen la utilidad general de los sistemas derivados de HEK293 para la expresión de proteínas recombinantes de alto nivel y los estudios de expresión génica transitoria. Sus características de crecimiento estable y su rendimiento reproducible las hacen adecuadas tanto para aplicaciones de investigación a pequeña escala como para entornos de producción escalables, siempre que se sigan las directrices estándar de bioseguridad y empaquetamiento de vectores para los sistemas lentivirales.

Pañuelo de papel
Riñón embrionario
Enfermedad
Línea celular transformada (células HEK transformadas con ADN de adenovirus tipo 5)
Aplicaciones
Producción de vectores lentivirales; transfección transitoria; expresión de proteínas recombinantes de alto nivel; empaquetamiento de virus.
Sinónimos
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
OGM
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Nivel de bioseguridad
2

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliales renales embrionarias
Tumorigénico
tumorigénico en ratones inmunodeprimidos (para 293T)
Estado de ploidía
Aneuploide, hipotriploide (notificado para 293T)
Cariotipo
Cariotipo humano aneuploide con múltiples anomalías cromosómicas (típico de 293T)
Tiempo de duplicación
20-24 horas

04Identificadores

Referencia
Lenti-X293T (número de catálogo de Cytion 305820)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
Antígeno T grande del SV40
Expresión de antígenos
Antígeno T grande del SV40
Oncogenes
Antígeno T grande del SV40
Perfil mutacional
No está completamente caracterizado; contiene ADN integrado del adenovirus 5 y una construcción del antígeno T grande del SV40.
Virus
Contiene ADN del adenovirus tipo 5; expresa el antígeno T grande del SV40.
Susceptibilidad a los virus
Altamente permisivo para la producción de lentivirus.

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Dividir antes de alcanzar la confluencia completa; esperar hasta 48 horas para que se produzca la adhesión completa tras la descongelación.
Relación de división
Se recomienda una proporción de 1:5 a 1:10.
Densidad de siembra
De 2 a 4 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
Cada 2-3 días
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Control de calidad y criopreservación

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos medio de crecimiento completo + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Feto