
- Kudos
- Alkion munuainen
- Sairaus
- Muunnettu solulinja (adenovirus tyyppi 5 DNA-muunnettu HEK-solut)
- Synonyymit
- Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T
Asiakirjat
Lenti-X293T
Cell line · Tuotenumero 305820
Lenti-X293T-solut ovat ihmisen alkion munuaisista peräisin olevan 293T-solulinjan johdannaisia, jotka on kehitetty ja optimoitu nimenomaan tehokkaita lentiviruksen vektoreita varten...
Räätälöinti / Suositukset
- Lenti-X293TCell line€550.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
Lenti-X293T-solut ovat johdannaisia ihmisen alkion munuaisesta 293T-suvusta, jotka on kehitetty ja optimoitu erityisesti tehokkaaseen lentiviruksen vektorituotantoon. Kuten emosolut 293T, ne ilmentävät stabiilisti SV40-suurta T-antigeeniä, joka mahdollistaa SV40-replikaation alkuperää sisältävien plasmidien episomaalisen replikaation ja parantaa merkittävästi väliaikaista transfektiotehokkuutta. Lenti-X293T-solut osoittavat adheesiivista epiteelimorfologiaa ja vahvoja kasvun ominaisuuksia tavallisissa seerumilla täydennetyissä viljelyolosuhteissa, mikä tukee suuritiheyksisiä viljelmiä, jotka sopivat suurten virusten tuotantoprosesseihin.
Tämä solulinja on valittu sen erinomaisen transfektiotehokkuuden vuoksi kalsiumfosfaatti-, lipidi- tai polymeeripohjaisten reagenssien kanssa, mikä johtaa jatkuvasti korkeampiin lentivirustitteriin verrattuna tavanomaisiin HEK293T-populaatioihin. Parannettu virustuotanto johtuu optimoidusta solufysiologiasta, joka tukee tehokasta plasmidi-ottoa, voimakasta transgeenien ilmentymistä sekä replikaatiokyvytön lentiviruksen partikkelien tehokasta kokoamista ja vapautumista, kun ne transfektoidaan yhdessä sopivien pakkaus- ja kuorikonstruktioiden kanssa. Lenti-X293T-soluja käytetäänkin laajalti kolmannen sukupolven lentiviruksen vektoreiden tuottamiseen geeninsiirrossa, geenien muokkauksessa ja stabiilien solulinjojen suunnittelussa.
Lenti-X293T-solut säilyttävät HEK293-johdettujen järjestelmien yleisen käyttökelpoisuuden korkean tason rekombinanttiproteiinin ilmentymisessä ja väliaikaisissa geenin ilmentymistutkimuksissa. Niiden vakaa kasvuominaisuus ja toistettava suorituskyky tekevät niistä sopivia sekä pienimuotoisiin tutkimussovelluksiin että skaalautuviin tuotantoympäristöihin, edellyttäen että lentivirussysteemeissä noudatetaan standardinmukaisia bioturvallisuus- ja vektori-pakkausohjeita.
- Kudos
- Alkion munuainen
- Sairaus
- Muunnettu solulinja (adenovirus tyyppi 5 DNA-muunnettu HEK-solut)
- Sovellukset
- Lentiviruksen vektori tuotanto; väliaikainen transfektio; korkeatasoinen rekombinanttiproteiinin ilmentyminen; viruksen pakkaus
- Synonyymit
- Lenti-X 293T
- 293T
- HEK 293T
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Nainen
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- GMO-status
- GMO
- GMO-statuksen tiedot
- GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
- Bioturvallisuustaso
- 2
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
- Solutyyppi
- Alkion munuaisepiteelisolut
- Kasvaimia aiheuttava
- kasvainten muodostumista aiheuttava immuunipuutteisissa hiirissä (293T:n osalta)
- Ploidisuus
- Aneuploidi, hypotriploidi (raportoitu 293T:lle)
- Karyotyyppi
- Aneuploidinen ihmisen karyotyyppi, jossa on useita kromosomipoikkeavuuksia (tyypillistä 293T:lle)
- Kaksinkertaistumisaika
- 20–24 tuntia
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- Lenti-X293T (Cytion-tuotenumero 305820)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063 (parental 293T)
05Ilmentyminen ja alttius
- Proteiinin ilmentyminen
- SV40-suuri T-antigeeni
- Antigeenin ilmentyminen
- SV40-suuri T-antigeeni
- Onkogeenit
- SV40-suuri T-antigeeni
- Mutaatioprofiili
- Ei täysin karakterisoitu; sisältää integroitua adenovirus 5 -DNA:ta ja SV40-suuren T-antigeenin konstruktin.
- Virukset
- Sisältää adenoviruksen tyypin 5 DNA:ta; ilmentää SV40-suurta T-antigeeniä.
- Viruksille altistuminen
- Erittäin suotuisa lentiviruksen tuotannolle
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Jaa ennen täydellistä yhdistymistä; anna sulatuksen jälkeen 48 tuntia aikaa täydelliseen kiinnittymiseen.
- Jakosuhde
- Suositeltava suhde on 1:5–1:10.
- Kylvötiheys
- 2–4 x 104 solua/cm2
- Nesteen uusiminen
- 2–3 päivän välein
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- Sikiö
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä