Siirry sisältöön
Lenti-X293T
Kudos
Alkion munuainen
Sairaus
Muunnettu solulinja (adenovirus tyyppi 5 DNA-muunnettu HEK-solut)
Synonyymit
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Asiakirjat

Lenti-X293T

Cell line · Tuotenumero 305820

Lenti-X293T-solut ovat ihmisen alkion munuaisista peräisin olevan 293T-solulinjan johdannaisia, jotka on kehitetty ja optimoitu nimenomaan tehokkaita lentiviruksen vektoreita varten...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Lenti-X293T-solut ovat johdannaisia ihmisen alkion munuaisesta 293T-suvusta, jotka on kehitetty ja optimoitu erityisesti tehokkaaseen lentiviruksen vektorituotantoon. Kuten emosolut 293T, ne ilmentävät stabiilisti SV40-suurta T-antigeeniä, joka mahdollistaa SV40-replikaation alkuperää sisältävien plasmidien episomaalisen replikaation ja parantaa merkittävästi väliaikaista transfektiotehokkuutta. Lenti-X293T-solut osoittavat adheesiivista epiteelimorfologiaa ja vahvoja kasvun ominaisuuksia tavallisissa seerumilla täydennetyissä viljelyolosuhteissa, mikä tukee suuritiheyksisiä viljelmiä, jotka sopivat suurten virusten tuotantoprosesseihin.

Tämä solulinja on valittu sen erinomaisen transfektiotehokkuuden vuoksi kalsiumfosfaatti-, lipidi- tai polymeeripohjaisten reagenssien kanssa, mikä johtaa jatkuvasti korkeampiin lentivirustitteriin verrattuna tavanomaisiin HEK293T-populaatioihin. Parannettu virustuotanto johtuu optimoidusta solufysiologiasta, joka tukee tehokasta plasmidi-ottoa, voimakasta transgeenien ilmentymistä sekä replikaatiokyvytön lentiviruksen partikkelien tehokasta kokoamista ja vapautumista, kun ne transfektoidaan yhdessä sopivien pakkaus- ja kuorikonstruktioiden kanssa. Lenti-X293T-soluja käytetäänkin laajalti kolmannen sukupolven lentiviruksen vektoreiden tuottamiseen geeninsiirrossa, geenien muokkauksessa ja stabiilien solulinjojen suunnittelussa.

Lenti-X293T-solut säilyttävät HEK293-johdettujen järjestelmien yleisen käyttökelpoisuuden korkean tason rekombinanttiproteiinin ilmentymisessä ja väliaikaisissa geenin ilmentymistutkimuksissa. Niiden vakaa kasvuominaisuus ja toistettava suorituskyky tekevät niistä sopivia sekä pienimuotoisiin tutkimussovelluksiin että skaalautuviin tuotantoympäristöihin, edellyttäen että lentivirussysteemeissä noudatetaan standardinmukaisia bioturvallisuus- ja vektori-pakkausohjeita.

Kudos
Alkion munuainen
Sairaus
Muunnettu solulinja (adenovirus tyyppi 5 DNA-muunnettu HEK-solut)
Sovellukset
Lentiviruksen vektori tuotanto; väliaikainen transfektio; korkeatasoinen rekombinanttiproteiinin ilmentyminen; viruksen pakkaus
Synonyymit
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO
GMO-statuksen tiedot
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Alkion munuaisepiteelisolut
Kasvaimia aiheuttava
kasvainten muodostumista aiheuttava immuunipuutteisissa hiirissä (293T:n osalta)
Ploidisuus
Aneuploidi, hypotriploidi (raportoitu 293T:lle)
Karyotyyppi
Aneuploidinen ihmisen karyotyyppi, jossa on useita kromosomipoikkeavuuksia (tyypillistä 293T:lle)
Kaksinkertaistumisaika
20–24 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
Lenti-X293T (Cytion-tuotenumero 305820)
NCBI-verotunnus
9606

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
SV40-suuri T-antigeeni
Antigeenin ilmentyminen
SV40-suuri T-antigeeni
Onkogeenit
SV40-suuri T-antigeeni
Mutaatioprofiili
Ei täysin karakterisoitu; sisältää integroitua adenovirus 5 -DNA:ta ja SV40-suuren T-antigeenin konstruktin.
Virukset
Sisältää adenoviruksen tyypin 5 DNA:ta; ilmentää SV40-suurta T-antigeeniä.
Viruksille altistuminen
Erittäin suotuisa lentiviruksen tuotannolle

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Jaa ennen täydellistä yhdistymistä; anna sulatuksen jälkeen 48 tuntia aikaa täydelliseen kiinnittymiseen.
Jakosuhde
Suositeltava suhde on 1:5–1:10.
Kylvötiheys
2–4 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2–3 päivän välein
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Sikiö