
- Tkivo
- Embrionalna ledvica
- Bolezen
- Transformirana celična linija (adenovirus tipa 5 DNA-transformirane HEK celice)
- Sinonimi
- Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T
Dokumenti
Lenti-X293T
Cell line · Številka izdelka 305820
Celice Lenti-X293T so izpeljanka iz linije človeških embrionalnih ledvičnih celic 293T, ki so bile genetsko spremenjene in optimizirane posebej za visoko učinkovit lentiviralni vektor...
Prilagajanje / Priporočila
- Lenti-X293TCell line€550.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
Celice Lenti-X293T so derivat človeške embrionalne ledvice 293T, ki so bile posebej razvite in optimizirane za visoko učinkovito proizvodnjo lentiviralnih vektorjev. Podobno kot matične celice 293T stabilno izražajo velik antigen SV40 T, ki omogoča episomalno replikacijo plazmidov, ki vsebujejo izvor replikacije SV40, in znatno poveča učinkovitost prehodne transfekcije. Celice Lenti-X293T kažejo adhezivno epitelno morfologijo in robustne rastne lastnosti v standardnih pogojih gojenja s serumskim dodatkom, kar omogoča gojenje v visoki gostoti, primerno za velikoserijsko proizvodnjo virusov.
Ta celična linija je bila izbrana zaradi vrhunske učinkovitosti transfekcije z uporabo kalcijevega fosfata, lipidnih ali polimernih reagentov, kar ima za posledico dosledno povišane lentiviralne titere v primerjavi s konvencionalnimi populacijami HEK293T. Povečana virusna proizvodnja se pripisuje optimizirani celični fiziologiji, ki podpira učinkovito absorpcijo plazmidov, močno ekspresijo transgenov ter učinkovito sestavljanje in sproščanje lentivirusnih delcev, ki niso sposobni replikacije, ko se sočasno transfektirajo z ustreznimi konstrukcijami za pakiranje in ovoj. Celice Lenti-X293T se zato široko uporabljajo za ustvarjanje tretje generacije lentivirusnih vektorjev v aplikacijah za dostavo genov, urejanje genov in inženiring stabilnih celičnih linij.
Celice Lenti-X293T ohranjajo splošno uporabnost sistemov, pridobljenih iz HEK293, za visoko raven ekspresije rekombinantnih proteinov in študije prehodne ekspresije genov. Njihove stabilne rastne lastnosti in reproduktibilna zmogljivost jih naredijo primerne tako za raziskovalne aplikacije v majhnem obsegu kot za prilagodljive proizvodne nastavitve, pod pogojem, da se za lentiviralne sisteme upoštevajo standardna navodila za biološko varnost in pakiranje vektorjev.
- Tkivo
- Embrionalna ledvica
- Bolezen
- Transformirana celična linija (adenovirus tipa 5 DNA-transformirane HEK celice)
- Uporaba
- Proizvodnja lentiviralnih vektorjev; prehodna transfekcija; visoka raven ekspresije rekombinantnih proteinov; pakiranje virusov
- Sinonimi
- Lenti-X 293T
- 293T
- HEK 293T
02Razvrstitev
- Organizem
- Človek
- Seks
- Ženska
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Status GSO
- GSO
- Podrobnosti o statusu GSO
- GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
- Stopnja biološke varnosti
- 2
03Značilnosti
- Morfologija
- Epitelijam podobni
- Vrsta celice
- Embrionalne epitelne celice ledvic
- Tumorigeničen
- tumorigenen pri imunsko oslabljenih miših (za 293T)
- Ploidnost
- Aneuploid, hipotriploid (poročano za 293T)
- Kariotip
- Aneuploidni človeški kariotip z več kromosomskimi anomalijami (značilen za 293T)
- Čas podvojitve
- 20–24 ur
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- Lenti-X293T (številka kataloga Cytion 305820)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063 (parental 293T)
05Izražanje in dovzetnost
- Ekspresija beljakovin
- SV40 velik T antigen
- Ekspresija antigena
- SV40 velik T antigen
- Onkogeni
- SV40 velik T antigen
- Profil mutacij
- Ni v celoti opisan; vsebuje integrirano adenovirusno 5 DNA in SV40 velik T antigen konstrukt.
- Virusi
- Vsebuje adenovirus tipa 5 DNA; izraža SV40 velik T antigen
- Občutljivost na virus
- Zelo permisiven za proizvodnjo lentivirusov
06Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Razdelite pred popolnim združitvijo; po odmrzovanju počakajte do 48 ur, da se popolnoma pritrdi.
- Razmerje delitve
- Priporočljivo je razmerje od 1:5 do 1:10.
- Gostota setve
- 2 do 4 x 104 celic/cm2
- Obnova tekočine
- Vsake 2–3 dni
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
08Donator
- Starost darovalca
- Plod
09Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da