Preskoči na vsebino
Lenti-X293T
Tkivo
Embrionalna ledvica
Bolezen
Transformirana celična linija (adenovirus tipa 5 DNA-transformirane HEK celice)
Sinonimi
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Dokumenti

Lenti-X293T

Cell line · Številka izdelka 305820

Celice Lenti-X293T so izpeljanka iz linije človeških embrionalnih ledvičnih celic 293T, ki so bile genetsko spremenjene in optimizirane posebej za visoko učinkovit lentiviralni vektor...

€550.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice Lenti-X293T so derivat človeške embrionalne ledvice 293T, ki so bile posebej razvite in optimizirane za visoko učinkovito proizvodnjo lentiviralnih vektorjev. Podobno kot matične celice 293T stabilno izražajo velik antigen SV40 T, ki omogoča episomalno replikacijo plazmidov, ki vsebujejo izvor replikacije SV40, in znatno poveča učinkovitost prehodne transfekcije. Celice Lenti-X293T kažejo adhezivno epitelno morfologijo in robustne rastne lastnosti v standardnih pogojih gojenja s serumskim dodatkom, kar omogoča gojenje v visoki gostoti, primerno za velikoserijsko proizvodnjo virusov.

Ta celična linija je bila izbrana zaradi vrhunske učinkovitosti transfekcije z uporabo kalcijevega fosfata, lipidnih ali polimernih reagentov, kar ima za posledico dosledno povišane lentiviralne titere v primerjavi s konvencionalnimi populacijami HEK293T. Povečana virusna proizvodnja se pripisuje optimizirani celični fiziologiji, ki podpira učinkovito absorpcijo plazmidov, močno ekspresijo transgenov ter učinkovito sestavljanje in sproščanje lentivirusnih delcev, ki niso sposobni replikacije, ko se sočasno transfektirajo z ustreznimi konstrukcijami za pakiranje in ovoj. Celice Lenti-X293T se zato široko uporabljajo za ustvarjanje tretje generacije lentivirusnih vektorjev v aplikacijah za dostavo genov, urejanje genov in inženiring stabilnih celičnih linij.

Celice Lenti-X293T ohranjajo splošno uporabnost sistemov, pridobljenih iz HEK293, za visoko raven ekspresije rekombinantnih proteinov in študije prehodne ekspresije genov. Njihove stabilne rastne lastnosti in reproduktibilna zmogljivost jih naredijo primerne tako za raziskovalne aplikacije v majhnem obsegu kot za prilagodljive proizvodne nastavitve, pod pogojem, da se za lentiviralne sisteme upoštevajo standardna navodila za biološko varnost in pakiranje vektorjev.

Tkivo
Embrionalna ledvica
Bolezen
Transformirana celična linija (adenovirus tipa 5 DNA-transformirane HEK celice)
Uporaba
Proizvodnja lentiviralnih vektorjev; prehodna transfekcija; visoka raven ekspresije rekombinantnih proteinov; pakiranje virusov
Sinonimi
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GSO
Podrobnosti o statusu GSO
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Embrionalne epitelne celice ledvic
Tumorigeničen
tumorigenen pri imunsko oslabljenih miših (za 293T)
Ploidnost
Aneuploid, hipotriploid (poročano za 293T)
Kariotip
Aneuploidni človeški kariotip z več kromosomskimi anomalijami (značilen za 293T)
Čas podvojitve
20–24 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
Lenti-X293T (številka kataloga Cytion 305820)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
SV40 velik T antigen
Ekspresija antigena
SV40 velik T antigen
Onkogeni
SV40 velik T antigen
Profil mutacij
Ni v celoti opisan; vsebuje integrirano adenovirusno 5 DNA in SV40 velik T antigen konstrukt.
Virusi
Vsebuje adenovirus tipa 5 DNA; izraža SV40 velik T antigen
Občutljivost na virus
Zelo permisiven za proizvodnjo lentivirusov

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Razdelite pred popolnim združitvijo; po odmrzovanju počakajte do 48 ur, da se popolnoma pritrdi.
Razmerje delitve
Priporočljivo je razmerje od 1:5 do 1:10.
Gostota setve
2 do 4 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
Vsake 2–3 dni
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Plod