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Lenti-X293T
ティッシュ
胚性腎臓
病気
形質転換細胞株(アデノウイルス5型DNAで形質転換したHEK細胞)
同義語
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Lenti-X293T

Cell line · 製品番号 305820

Lenti-X293T細胞は、ヒト胚腎293T細胞系統を由来とする細胞株であり、高効率のレンチウイルスベクター用に特別に改変・最適化されたもので…

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01概要

説明

Lenti-X293T細胞は、ヒト胎児腎臓293T細胞株を起源とし、高効率レンチウイルスベクター生産に特化して設計・最適化された派生株である。親株である293T細胞と同様に、SV40大T抗原を安定発現しており、これによりSV40複製起点を含むプラスミドのエピソーム複製が可能となり、一過性トランスフェクション効率が大幅に向上する。 Lenti-X293T細胞は上皮細胞様の接着形態を示し、標準的な血清添加培養条件下で良好な増殖特性を示すため、大規模ウイルス生産ワークフローに適した高密度培養が可能である。

この細胞株は、リン酸カルシウム、脂質ベース、またはポリマーベースの試薬を用いた優れたトランスフェクション性能のために選択されており、従来の HEK293T 細胞株と比較して、一貫して高いレンチウイルス力価をもたらします。 ウイルス産生の向上は、最適化された細胞生理学に起因し、効率的なプラスミド取り込み、強力なトランスジーン発現、および適切なパッケージングおよびエンベロープ構築体との共トランスフェクション時の複製不能レンチウイルス粒子の効果的な組立・放出をサポートします。したがって、Lenti-X293T細胞は、遺伝子導入、遺伝子編集、および安定細胞株構築アプリケーションにおける第三世代レンチウイルスベクターの生成に広く使用されています。

Lenti-X293T細胞は、高レベルな組換えタンパク質発現および一過性遺伝子発現研究におけるHEK293由来システムの一般的な有用性を維持しています。安定した増殖特性と再現性のある性能により、レンチウイルスシステム向けの標準的なバイオセーフティおよびベクターパッケージングガイドラインが遵守される限り、小規模な研究用途からスケーラブルな生産環境まで幅広く適しています。

ティッシュ
胚性腎臓
病気
形質転換細胞株(アデノウイルス5型DNAで形質転換したHEK細胞)
用途
レンチウイルスベクターの作製;一過性トランスフェクション;高レベル組換えタンパク質発現;ウイルスパッキング
同義語
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO
GMOのステータスに関する詳細
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
バイオセーフティレベル
2

03特徴

形態学
上皮様
細胞の種類
胚性腎臓上皮細胞
腫瘍形成性
免疫不全マウスにおける腫瘍形成能(293T細胞用)
倍数性
非整倍体、低三倍体(293T細胞株で報告)
核型
複数の染色体異常を伴う非整倍性ヒト核型(293T細胞株に典型的なもの)
倍増時間
20~24時間

04識別子

引用
レンティ-X293T(Cytionカタログ番号 305820)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0063 (parental 293T)

05発現と感受性

タンパク質の発現
SV40大型T抗原
抗原発現
SV40大型T抗原
発がん遺伝子
SV40大型T抗原
変異プロファイル
完全には特徴付けられていない;組み込まれたアデノウイルス5型DNAおよびSV40大型T抗原構築体を含む
ウイルス
アデノウイルス5型DNAを含む;SV40大型T抗原を発現する
ウイルス感受性
レンチウイルス生産に対して非常に寛容である

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
完全な融合に達する前に分割し、解凍後の完全な付着には最大48時間を要する
分割比率
1:5から1:10の比率が推奨されます。
播種密度
2~4 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
2~3日おきに
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07品質管理と凍結保存

凍結培地
凍結保存培地としては、解凍後の生存率を十分に高めるため、完全増殖培地+10%DMSOを使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
胎児