Skip to content
Lenti-X293T
Tissue
ไตของตัวอ่อน
Disease
สายพันธุ์เซลล์ที่ถูกเปลี่ยนแปลง (เซลล์ HEK ที่ถูกเปลี่ยนแปลงด้วย DNA ของอะดีโนไวรัสชนิดที่ 5)
Synonyms
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Documents

Lenti-X293T

Cell line · Product number 305820

Lenti-X293T cells are a derivative of the human embryonic kidney 293T lineage, engineered and optimized specifically for high-efficiency lentiviral vector...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ Lenti-X293T เป็นสายพันธุ์ที่พัฒนาต่อมาจากเซลล์ไตของทารกในครรภ์มนุษย์สายพันธุ์ 293T โดยได้รับการดัดแปลงและปรับแต่งโดยเฉพาะสำหรับการผลิตเวกเตอร์ไวรัสเลนติไวรัสที่มีประสิทธิภาพสูง เช่นเดียวกับเซลล์ 293T ต้นกำเนิด เซลล์เหล่านี้สามารถแสดงออกของแอนติเจน SV40 large T ได้อย่างคงที่ ซึ่งช่วยให้พลาสมิดที่มีต้นกำเนิดการจำลองแบบของ SV40 สามารถจำลองแบบแบบ episomal ได้ และช่วยเพิ่มประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีนชั่วคราวอย่างมีนัยสำคัญ เซลล์ Lenti-X293T แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์เยื่อบุผิวที่เกาะติดและลักษณะการเจริญเติบโตที่แข็งแรงในสภาวะการเพาะเลี้ยงมาตรฐานที่มีการเติมซีรัม ซึ่งสนับสนุนการเพาะเลี้ยงที่มีความหนาแน่นสูงที่เหมาะสมกับกระบวนการผลิตไวรัสในระดับใหญ่

สายเซลล์นี้ได้รับการคัดเลือกให้มีประสิทธิภาพในการทรานส์เฟคชั่นที่เหนือกว่าโดยใช้สารช่วยทรานส์เฟคประเภทแคลเซียมฟอสเฟต ไลปิด หรือโพลิเมอร์ ส่งผลให้ระดับไทเทอร์ของเลนติไวรัสสูงขึ้นอย่างสม่ำเสมอเมื่อเทียบกับประชากร HEK293T แบบทั่วไป การผลิตไวรัสที่เพิ่มขึ้นนี้เกิดจากสรีรวิทยาของเซลล์ที่ได้รับการปรับให้เหมาะสม ซึ่งช่วยส่งเสริมการดูดซึมพลาสมิดอย่างมีประสิทธิภาพ การแสดงออกของยีนที่แข็งแกร่ง และการประกอบและปล่อยอนุภาคไวรัสเลนทิไวรัสที่ไม่สามารถทำซ้ำได้อย่างมีประสิทธิผลเมื่อถูกทรานส์เฟคพร้อมกันกับโครงสร้างบรรจุและโครงสร้างเปลือกที่เหมาะสม เซลล์ Lenti-X293T จึงถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการสร้างเวกเตอร์ไวรัสเลนทิไวรัสรุ่นที่สามสำหรับการนำยีน การแก้ไขยีน และการวิศวกรรมสายพันธุ์เซลล์ที่คงที่

เซลล์ Lenti-X293T ยังคงรักษาประโยชน์ทั่วไปของระบบที่พัฒนามาจาก HEK293 สำหรับการแสดงโปรตีนรีคอมบิแนนท์ในระดับสูงและการศึกษาการแสดงออกของยีนชั่วคราว คุณลักษณะการเจริญเติบโตที่เสถียรและประสิทธิภาพที่สามารถทำซ้ำได้ทำให้เซลล์เหล่านี้เหมาะสมสำหรับการใช้งานวิจัยขนาดเล็กและการผลิตที่สามารถขยายขนาดได้ โดยต้องปฏิบัติตามแนวทางมาตรฐานด้านความปลอดภัยทางชีวภาพและการบรรจุเวกเตอร์สำหรับระบบไวรัสเลนติไวรัส

Tissue
ไตของตัวอ่อน
Disease
สายพันธุ์เซลล์ที่ถูกเปลี่ยนแปลง (เซลล์ HEK ที่ถูกเปลี่ยนแปลงด้วย DNA ของอะดีโนไวรัสชนิดที่ 5)
Applications
การผลิตเวกเตอร์เลนติไวรัส; การถ่ายโอนยีนชั่วคราว; การแสดงออกของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ระดับสูง; การบรรจุไวรัส
Synonyms
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO
GMO status details
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุผิวไตระยะตัวอ่อน
Tumourigenic
ก่อให้เกิดเนื้องอกในหนูที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่อง (สำหรับ 293T)
Ploidy status
อะนีเพิลอยด์, ไฮโปทริปพลอยด์ (รายงานสำหรับ 293T)
Karyotype
โครโมโซมของมนุษย์ที่มีจำนวนโครโมโซมไม่ปกติ (Aneuploid) พร้อมความผิดปกติของโครโมโซมหลายตำแหน่ง (เป็นลักษณะทั่วไปของเซลล์ 293T)
Doubling time
20-24 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
Lenti-X293T (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305820)
NCBI TaxID
9606

05Expression and susceptibility

Protein expression
เอสวี40 แลงก์เกอ T แอนติเจน
Antigen expression
เอสวี40 แลงก์เกอ T แอนติเจน
Oncogenes
เอสวี40 แลงก์เกอ T แอนติเจน
Mutational profile
ยังไม่ได้รับการระบุลักษณะอย่างสมบูรณ์; ประกอบด้วยดีเอ็นเอของอะดีโนไวรัส 5 ที่รวมอยู่และโครงสร้างแอนติเจน T ขนาดใหญ่ของ SV40
Viruses
ประกอบด้วยดีเอ็นเอของอะดีโนไวรัสชนิดที่ 5; แสดงแอนติเจน T ขนาดใหญ่ของ SV40
Virus susceptibility
มีความยืดหยุ่นสูงสำหรับการผลิตไวรัสเลนติไวรัส

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
แยกก่อนถึงจุดรวมตัวเต็มที่; อนุญาตให้ใช้เวลาถึง 48 ชั่วโมงสำหรับการยึดติดเต็มที่หลังการละลาย
Split ratio
อัตราส่วนที่แนะนำคือ 1:5 ถึง 1:10
Seeding density
2 ถึง 4 x 104 เซลล์/ซม.
Fluid renewal
ทุกๆ 2-3 วัน
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
ทารกในครรภ์