Gå til innholdet
Lenti-X293T
Vev
Embryonal nyre
Sykdom
Transformert cellelinje (adenovirus type 5 DNA-transformerte HEK-celler)
Synonymer
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Dokumenter

Lenti-X293T

Cell line · Produktnummer 305820

Lenti-X293T-celler er en avart av den humane embryonale nyrecellen 293T, som er utviklet og optimalisert spesielt for høyeffektiv lentiviral vektor...

€550.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Lenti-X293T-celler er et derivat av den humane embryonale nyre 293T-linjen, konstruert og optimalisert spesielt for høyeffektiv lentiviral vektorproduksjon. I likhet med foreldreceller 293T uttrykker de stabilt SV40 large T-antigenet, som muliggjør episomal replikasjon av plasmider som inneholder SV40-replikasjonsopprinnelsen og forbedrer den midlertidige transfeksjonseffektiviteten betydelig. Lenti-X293T-celler har en adherent epitelmorfologi og robuste vekstegenskaper under standard serumtilskuddsbetingelser, noe som støtter høydensitetskulturer som er egnet for storskala virusproduksjonsarbeidsflyter.

Denne cellelinjen er valgt for sin overlegne transfeksjonsytelse ved bruk av kalsiumfosfat-, lipidbaserte eller polymerbaserte reagenser, noe som resulterer i gjennomgående forhøyede lentivirale titere sammenlignet med konvensjonelle HEK293T-populasjoner. Den forbedrede virusproduksjonen tilskrives optimalisert cellefysiologi som støtter effektiv plasmidopptak, sterk transgenuttrykk og effektiv sammensetning og frigjøring av replikasjonsinkompetente lentivirale partikler når de co-transfekteres med passende paknings- og konvoluttkonstruksjoner. Lenti-X293T-celler brukes derfor mye til generering av tredje generasjons lentivirale vektorer i genlevering, genredigering og stabile cellelinje-ingeniørapplikasjoner.

Lenti-X293T-celler opprettholder den generelle nytten av HEK293-avledede systemer for høyt nivå av rekombinant proteinekspresjon og transiente genekspresjonsstudier. Deres stabile vekstegenskaper og reproduserbare ytelse gjør dem egnet for både småskala forskningsapplikasjoner og skalerbare produksjonsmiljøer, forutsatt at standard retningslinjer for biosikkerhet og vektorpakking følges for lentivirale systemer.

Vev
Embryonal nyre
Sykdom
Transformert cellelinje (adenovirus type 5 DNA-transformerte HEK-celler)
Søknader
Produksjon av lentivirale vektorer; transient transfeksjon; høyt nivå av rekombinant proteinekspresjon; viruspakking
Synonymer
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO
Detaljer om GMO-status
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Embryonale nyreepitelceller
Tumorinduserende
tumorigenisk hos immunsvekkede mus (for 293T)
Ploidistatus
Aneuploid, hypotriploid (rapportert for 293T)
Karyotype
Aneuploid menneskelig karyotype med flere kromosomavvik (typisk for 293T)
Fordoblingstid
20-24 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Lenti-X293T (Cytion katalognummer 305820)
NCBI-skattenummer
9606

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
SV40 stort T-antigen
Antigenuttrykk
SV40 stort T-antigen
Onkogener
SV40 stort T-antigen
Mutasjonsprofil
Ikke fullstendig karakterisert; inneholder integrert adenovirus 5-DNA og SV40 stort T-antigenkonstrukt
Virus
Inneholder adenovirus type 5 DNA; uttrykker SV40 stort T-antigen
Virusfølsomhet
Svært tillatende for lentiviral produksjon

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Del før full sammensmelting; vent opptil 48 timer for full festing etter tining.
Oppdelingsforhold
Det anbefales et forhold på 1:5 til 1:10.
Såtetthet
2 til 4 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
Hver 2-3 dag
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium + 10 % DMSO for å sikre tilstrekkelig levedyktighet etter opptining.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
Foster