Gå direkte til indholdet
Lenti-X293T
Væv
Embryonal nyre
Sygdom
Transformeret cellelinje (adenovirus type 5 DNA-transformere HEK-celler)
Synonymer
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Dokumenter

Lenti-X293T

Cell line · Varenummer 305820

Lenti-X293T-celler er en afart af den humane embryonale nyre-293T-cellelinje, der er udviklet og optimeret specifikt til højeffektive lentivirale vektorer...

€550.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Lenti-X293T-celler er et derivat af den humane embryonale nyre 293T-stamme, der er udviklet og optimeret specifikt til højeffektiv produktion af lentivirale vektorer. Ligesom de oprindelige 293T-celler udtrykker de stabilt det store SV40-T-antigen, hvilket muliggør episomal replikation af plasmider, der indeholder SV40-replikationsoprindelsen, og forbedrer den midlertidige transfektionseffektivitet betydeligt. Lenti-X293T-celler udviser en adhærent epitelmorfologi og robuste vækstkarakteristika under standardkulturforhold med serumtilskud, hvilket understøtter højdensitetskulturer, der er egnede til storstilet viral produktionsworkflow.

Denne cellelinje er blevet udvalgt for sin overlegne transfektionsydelse ved brug af calciumphosphat-, lipid- eller polymerbaserede reagenser, hvilket resulterer i konsekvent forhøjede lentivirale titere sammenlignet med konventionelle HEK293T-populationer. Den forbedrede virale produktion tilskrives optimeret cellulær fysiologi, der understøtter effektiv plasmidoptagelse, stærk transgenekspression og effektiv samling og frigivelse af replikationsinkompetente lentivirale partikler, når de co-transficeres med passende emballage- og kuvertkonstruktioner. Lenti-X293T-celler bruges derfor i vid udstrækning til generering af tredje generations lentivirale vektorer i genlevering, genredigering og stabile cellelinje-engineering-applikationer.

Lenti-X293T-celler bevarer den generelle anvendelighed af HEK293-afledte systemer til højt niveau af rekombinant proteinekspression og transiente genekspressionsstudier. Deres stabile vækstkarakteristika og reproducerbare ydeevne gør dem velegnede til både små forskningsapplikationer og skalerbare produktionsmiljøer, forudsat at standardretningslinjer for biosikkerhed og vektorpakning følges for lentivirale systemer.

Væv
Embryonal nyre
Sygdom
Transformeret cellelinje (adenovirus type 5 DNA-transformere HEK-celler)
Anvendelser
Produktion af lentivirale vektorer; transient transfektion; højt niveau af rekombinant proteinekspression; viruspakning
Synonymer
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO
Oplysninger om GMO-status
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Embryonale nyreepitelceller
Tumorfremkaldende
tumorigenisk hos immunforsvarssvækkede mus (for 293T)
Ploidistatus
Aneuploid, hypotriploid (rapporteret for 293T)
Karyotype
Aneuploid menneskelig karyotype med flere kromosomafvigelser (typisk for 293T)
Fordoblingstid
20-24 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Lenti-X293T (Cytion-katalognummer 305820)
NCBI-skattenummer
9606

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
SV40 stort T-antigen
Antigenudtryk
SV40 stort T-antigen
Onkogener
SV40 stort T-antigen
Mutationsprofil
Ikke fuldt karakteriseret; indeholder integreret adenovirus 5-DNA og SV40 stort T-antigenkonstrukt
Vira
Indeholder adenovirus type 5 DNA; udtrykker SV40 stort T-antigen
Virusfølsomhed
Meget tilladende for lentiviral produktion

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Opdel inden fuld sammenflydning; vent op til 48 timer efter optøning, indtil fuld vedhæftning er opnået.
Opdelingsforhold
Et forhold på 1:5 til 1:10 anbefales.
Såtæthed
2 til 4 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
Hver 2-3 dag
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium + 10 % DMSO for at opnå tilstrækkelig levedygtighed efter optøning.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Foster