HEp-2

La lignée cellulaire HEp-2, dont on pensait à l'origine qu'elle était dérivée de cellules de cancer du larynx, a ensuite été identifiée, grâce à l'empreinte ADN et à la présence de chromosomes marqueurs HeLa, comme étant contaminée par des cellules HeLa, une lignée cellulaire dérivée d'un cancer du col de l'utérus.

Malgré cela, la lignée cellulaire HEp-2 reste largement utilisée en immunofluorescence indirecte pour détecter les anticorps antinucléaires (ANA), qui sont essentiels pour diagnostiquer des maladies telles que le lupus érythémateux disséminé et la sclérose systémique. Le test d'immunofluorescence indirecte (IIFA) utilisant des cellules HEp-2, qui donne des résultats positifs ou négatifs clairs, est la méthode standard pour tester les anticorps antinucléaires. Cette approche simple est cruciale pour le diagnostic et la classification des différentes maladies auto-immunes systémiques.

Les profils d'auto-anticorps observés en immunofluorescence indirecte sur cellules HEp-2, en particulier dans le contexte de la rhumatologie, fournissent des informations précieuses sur les différentes maladies rhumatismales. En outre, l'examen complet des antigènes exprimés par les cellules humaines HEp-2 dans différentes conditions de culture permet d'identifier des ANA spécifiques liés à des maladies telles que le lupus.

En conclusion, bien que la contamination de lignées cellulaires telles que HEp-2 par des cellules HeLa ait suscité des inquiétudes dans la recherche sur le cancer quant à la précision et à la fiabilité des résultats et à leur pertinence clinique, l'utilité de Hep-2 dans la détection des anticorps antinucléaires et son application dans diverses disciplines de recherche soulignent son importance continue. La lignée cellulaire HEp-2 est un outil essentiel pour le diagnostic et la classification des maladies auto-immunes, entre autres applications.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie