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HEp-2
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Hep-2, HEP-2, HEp-2/HeLa, Hep 2, Hep2, HEp2, HEP2, H.Ep.-2, H.Ep. #2, H.Ep. No. 2, Hep II, Human Epidermoid carcinoma #2, Human Epithelioma-2

HEp-2

Cell line · 제품 번호 300397

The HEp-2 cell line, originally believed to be derived from laryngeal cancer cells, was later identified through DNA fingerprinting and the presence of He...

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롯
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01일반 정보

설명

원래 후두암 세포에서 유래한 것으로 여겨지던 HEp-2 세포주는 나중에 DNA 지문과 HeLa 마커 염색체의 존재를 통해 자궁경부암에서 유래한 세포주인 HeLa 세포에 오염된 것으로 확인되었습니다.

그럼에도 불구하고 HEp-2 세포주는 전신성 홍반성 루푸스 및 전신 경화증과 같은 질환을 진단하는 데 중요한 항핵 항체(ANA)를 검출하는 간접 면역 형광법에서 여전히 광범위하게 활용되고 있습니다. 명확한 양성 또는 음성 결과를 제공하는 HEp-2 세포를 사용하는 간접 면역 형광 분석법(IIFA)은 항핵 항체를 검사하는 표준 방법입니다. 이 간단한 접근 방식은 다양한 전신 자가면역 질환을 진단하고 분류하는 데 매우 중요합니다.

특히 류마티스의 맥락에서 HEp-2 세포의 간접 면역 형광에서 관찰되는 자가 항체 패턴은 다양한 류마티스 질환에 대한 귀중한 통찰력을 제공합니다. 또한 다양한 배양 조건에서 HEp-2 인간 세포에 의해 발현되는 항원을 종합적으로 검토하면 루푸스와 같은 질병과 관련된 특정 ANA를 식별할 수 있습니다.

결론적으로, HEp-2와 같은 세포주가 HeLa 세포로 오염되면서 암 연구 분야에서 결과의 정확성과 신뢰성, 임상적 관련성에 대한 우려가 제기되고 있지만, 항핵 항체 검출에 대한 Hep-2의 유용성과 다양한 연구 분야에 대한 적용은 그 지속적인 중요성을 강조하고 있습니다. HEp-2 세포주는 자가면역 질환을 진단하고 분류하는 데 필수적인 도구로 활용되고 있습니다.

티슈
후두
질병
선암종
응용 분야
류마티스학에서 HEp-2 세포를 이용한 간접 면역 형광은 전신성 홍반성 루푸스 및 전신 경화증을 포함한 자가 면역 질환을 진단하는 데 중요한 역할을 합니다
동의어
  • Hep-2
  • HEP-2
  • HEp-2/HeLa
  • Hep 2
  • Hep2
  • HEp2
  • HEP2
  • H.Ep.-2
  • H.Ep. #2
  • H.Ep. No. 2
  • Hep II
  • Human Epidermoid carcinoma #2
  • Human Epithelioma-2

02분류

생물체
인간
성
여성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
상피 유사

04식별자

인용
HEp-2(사이티온 카탈로그 번호 300397)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_1906

05발현 및 감수성

이소효소
G6PD, A
역전사효소
부정적
제품
케라틴

06취급 및 배양

배지
EMEM(MEM 이글), w: 2mM L-글루타민, w: 2.2g/L NaHCO3, w: EBSS(사이티온 제품 번호 820100a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 10% FBS와 1% NEAA를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
1 x 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
해동 후 세포를 5 x 10⁴ 세포/cm² 농도로 배지에 접종하고, 동결 과정으로부터 회복 및 부착이 완료될 때까지 최소 24시간 동안 배양합니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
30년
민족
아프리카계 미국인