HEp-2

HEp-2-solulinja, jonka alun perin uskottiin olevan peräisin kurkunpään syöpäsoluista, tunnistettiin myöhemmin DNA-sormenjälkien ja HeLa-merkkikromosomien esiintymisen perusteella kontaminoituneeksi HeLa-soluista, jotka olivat peräisin kohdunkaulan syövästä.

Tästä huolimatta HEp-2-solulinjaa hyödynnetään edelleen laajalti epäsuorassa immunofluoresenssissa antinukleaaristen vasta-aineiden (ANA) havaitsemiseksi, jotka ovat avainasemassa diagnosoitaessa sairauksia, kuten systeemistä lupus erythematosusta ja systeemistä skleroosia. Epäsuora immunofluoresenssimääritys (IIFA), jossa käytetään HEp-2-soluja ja joka antaa selkeän positiivisen tai negatiivisen tuloksen, on vakiomenetelmä antinukleaaristen vasta-aineiden testauksessa. Tämä suoraviivainen menetelmä on ratkaisevan tärkeä erilaisten systeemisten autoimmuunisairauksien diagnosoinnissa ja luokittelussa.

Epäsuorassa immunofluoresenssissa HEp-2-soluilla havaitut autovasta-aineiden mallit tarjoavat erityisesti reumatologian yhteydessä korvaamattomia tietoja erilaisista reumasairauksista. Lisäksi kattava katsaus ihmisen HEp-2-solujen eri viljelyolosuhteissa ilmentämiin antigeeneihin mahdollistaa lupuksen kaltaisiin sairauksiin liittyvien spesifisten ANA:iden tunnistamisen.

Lopuksi voidaan todeta, että vaikka HEp-2:n kaltaisten solulinjojen kontaminaatio HeLa-solujen kanssa on herättänyt syöpätutkimuksessa huolta tulosten tarkkuudesta ja luotettavuudesta sekä niiden kliinisestä merkityksestä, Hep-2:n hyödyllisyys antinukleaaristen vasta-aineiden osoittamisessa ja sen soveltaminen eri tutkimusaloilla korostavat sen jatkuvaa merkitystä. HEp-2-solulinja on tärkeä väline muun muassa autoimmuunisairauksien diagnosoinnissa ja luokittelussa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa