- Tisu
- Laring
- Penyakit
- Adenokarsinoma
- Sinonim
- Hep-2, HEP-2, HEp-2/HeLa, Hep 2, Hep2, HEp2, HEP2, H.Ep.-2, H.Ep. #2, H.Ep. No. 2, Hep II, Human Epidermoid carcinoma #2, Human Epithelioma-2
Dokumen
HEp-2
Cell line · Nomor produk 300397
The HEp-2 cell line, originally believed to be derived from laryngeal cancer cells, was later identified through DNA fingerprinting and the presence of He...
Penyesuaian / Rekomendasi
- HEp-2Cell line€430.00
Direkomendasikan (stok terbaru)
01Informasi umum
- Deskripsi
Garis sel HEp-2, yang awalnya diyakini berasal dari sel kanker laring, kemudian diidentifikasi melalui sidik jari DNA dan adanya kromosom penanda HeLa yang terkontaminasi dengan sel HeLa, garis sel yang berasal dari kanker serviks.
Meskipun demikian, garis sel HEp-2 tetap digunakan secara luas dalam imunofluoresensi tidak langsung untuk mendeteksi antibodi antinuklear (ANA), yang merupakan kunci dalam mendiagnosis kondisi seperti lupus eritematosus sistemik dan sklerosis sistemik. Uji imunofluoresensi tidak langsung (indirect immunofluorescence assay, IIFA) menggunakan sel HEp-2, yang memberikan hasil positif atau negatif yang jelas, merupakan metode standar untuk menguji antibodi antinuklear. Pendekatan langsung ini sangat penting untuk mendiagnosis dan mengklasifikasikan berbagai penyakit autoimun sistemik.
Pola autoantibodi yang diamati dalam imunofluoresensi tidak langsung pada sel HEp-2, terutama dalam konteks reumatologi, memberikan wawasan yang sangat berharga tentang berbagai penyakit reumatik. Selain itu, tinjauan komprehensif terhadap antigen yang diekspresikan oleh sel manusia HEp-2 dalam kondisi kultur yang berbeda memungkinkan identifikasi ANA spesifik yang terkait dengan penyakit seperti lupus.
Sebagai kesimpulan, sementara kontaminasi garis sel seperti HEp-2 dengan sel HeLa telah memicu kekhawatiran dalam penelitian kanker tentang keakuratan dan keandalan hasil dan relevansi klinisnya, utilitas Hep-2 dalam mendeteksi antibodi antinuklear dan aplikasinya di berbagai disiplin ilmu menggarisbawahi kepentingannya yang berkelanjutan. Garis sel HEp-2 berfungsi sebagai alat penting dalam mendiagnosis dan mengklasifikasikan penyakit autoimun, di antara aplikasi lainnya.
- Tisu
- Laring
- Penyakit
- Adenokarsinoma
- Aplikasi
- Dalam bidang rematologi, imunofluoresensi tidak langsung menggunakan sel HEp-2 memainkan peran penting dalam mendiagnosis penyakit autoimun, termasuk lupus eritematosus sistemik dan sklerosis sistemik
- Sinonim
- Hep-2
- HEP-2
- HEp-2/HeLa
- Hep 2
- Hep2
- HEp2
- HEP2
- H.Ep.-2
- H.Ep. #2
- H.Ep. No. 2
- Hep II
- Human Epidermoid carcinoma #2
- Human Epithelioma-2
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Perempuan
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Seperti epitel
04Pengidentifikasi
- Referensi
- HEp-2 (nomor katalog Cytion 300397)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1906
05Ekspresi dan kerentanan
- Isoenzim
- G6PD, A
- Transkriptase balik
- Negatif
- Produk
- Keratin
06Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
- Reagen disosiasi
- Accutase
- Perbanyakan sel
- Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
- Kepadatan penanaman
- 1 x 10⁴ sel/cm²
- Pergantian cairan
- 2 hingga 3 kali per minggu
- Pemulihan pasca-pencairan
- Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
08Donatur
- Usia donor
- 30 tahun
- Etnis
- Afrika-Amerika
09Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Diperlukan Perjanjian Transfer Material
- Ya