HEp-2

Buněčná linie HEp-2, o níž se původně předpokládalo, že pochází z buněk rakoviny hrtanu, byla později pomocí otisků DNA a přítomnosti markerových chromozomů HeLa identifikována jako kontaminovaná s buňkami HeLa, buněčnou linií pocházející z rakoviny děložního čípku.

Přesto je buněčná linie HEp-2 nadále hojně využívána v nepřímé imunofluorescenci k detekci antinukleárních protilátek (ANA), které jsou klíčové při diagnostice stavů, jako je systémový lupus erythematodes a systémová skleróza. Standardní metodou pro testování antinukleárních protilátek je nepřímý imunofluorescenční test (IIFA) s použitím HEp-2 buněk, který poskytuje jasné pozitivní nebo negativní výsledky. Tento jednoduchý přístup má zásadní význam pro diagnostiku a klasifikaci různých systémových autoimunitních onemocnění.

Vzorce autoprotilátek pozorované při nepřímé imunofluorescenci na HEp-2 buňkách, zejména v kontextu revmatologie, poskytují neocenitelné poznatky o různých revmatických onemocněních. Komplexní přehled antigenů exprimovaných lidskými buňkami HEp-2 za různých kultivačních podmínek navíc umožňuje identifikovat specifické ANA spojené s nemocemi, jako je lupus.

Závěrem lze říci, že ačkoli kontaminace buněčných linií, jako jsou HEp-2, buňkami HeLa vyvolala ve výzkumu rakoviny obavy o přesnost a spolehlivost výsledků a jejich klinickou relevanci, užitečnost HEp-2 při detekci antinukleárních protilátek a její využití v různých výzkumných oborech podtrhuje její trvalý význam. Buněčná linie HEp-2 slouží mimo jiné jako základní nástroj při diagnostice a klasifikaci autoimunitních onemocnění.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení