الانتقال إلى المحتوى
HEp-2
الأنسجة
الحنجرة
المرض
السرطان الغدي
المرادفات
Hep-2, HEP-2, HEp-2/HeLa, Hep 2, Hep2, HEp2, HEP2, H.Ep.-2, H.Ep. #2, H.Ep. No. 2, Hep II, Human Epidermoid carcinoma #2, Human Epithelioma-2

المستندات

HEp-2

Cell line · رقم المنتج 300397

The HEp-2 cell line, originally believed to be derived from laryngeal cancer cells, was later identified through DNA fingerprinting and the presence of He...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تم تحديد خط خلايا HEp-2، الذي كان يُعتقد في الأصل أنه مشتق من خلايا سرطان الحنجرة، في وقت لاحق من خلال بصمة الحمض النووي ووجود كروموسومات علامة HeLa على أنها ملوثة بخلايا HeLa، وهو خط خلوي مشتق من سرطان عنق الرحم.

على الرغم من ذلك، لا يزال خط خلايا HEp-2 يُستخدم على نطاق واسع في التألق المناعي غير المباشر للكشف عن الأجسام المضادة للنواة (ANAs)، والتي تعتبر أساسية في تشخيص حالات مثل الذئبة الحمامية الجهازية والتصلب الجهازي. يُعدّ اختبار التألق المناعي غير المباشر (IIFA) باستخدام خلايا HEp-2، الذي يوفر نتائج إيجابية أو سلبية واضحة، الطريقة القياسية لاختبار الأجسام المضادة للنواة. هذا النهج المباشر مهم لتشخيص وتصنيف أمراض المناعة الذاتية الجهازية المختلفة.

وتوفر أنماط الأجسام المضادة الذاتية التي لوحظت في التألق المناعي غير المباشر على خلايا HEp-2، خاصةً في سياق أمراض الروماتيزم، رؤى لا تقدر بثمن في مختلف الأمراض الروماتيزمية. وعلاوة على ذلك، فإن الاستعراض الشامل للمستضدات التي تعبر عنها خلايا HEp-2 البشرية في ظل ظروف الاستنبات المختلفة يتيح تحديد الأجسام المضادة المحددة المرتبطة بأمراض مثل الذئبة.

في الختام، في حين أن تلوث خطوط الخلايا مثل HEp-2 بخلايا هيلا قد أثار مخاوف في أبحاث السرطان حول دقة وموثوقية النتائج وأهميتها السريرية، فإن فائدة Hep-2 في الكشف عن الأجسام المضادة للنواة وتطبيقه في مختلف التخصصات البحثية يؤكدان على أهميته المستمرة. يعمل خط خلايا Hep-2 كأداة أساسية في تشخيص وتصنيف أمراض المناعة الذاتية، من بين تطبيقات أخرى.

الأنسجة
الحنجرة
المرض
السرطان الغدي
التطبيقات
في أمراض الروماتيزم، يلعب التألق المناعي غير المباشر باستخدام خلايا HEp-2 دورًا حاسمًا في تشخيص أمراض المناعة الذاتية، بما في ذلك الذئبة الحمامية الجهازية والتصلب الجهازي
المرادفات
  • Hep-2
  • HEP-2
  • HEp-2/HeLa
  • Hep 2
  • Hep2
  • HEp2
  • HEP2
  • H.Ep.-2
  • H.Ep. #2
  • H.Ep. No. 2
  • Hep II
  • Human Epidermoid carcinoma #2
  • Human Epithelioma-2

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة

04المعرّفات

المرجع
هيب-2 (كتالوج سيتيون رقم 300397)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1906

05التعبير والقابلية للإصابة

الإيزوزيمات
G6PD، أ
إنزيم النسخ العكسي
سلبي
المنتجات
الكيراتين

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
30 سنة
الأصل العرقي
أمريكي من أصل أفريقي