HEp-2

HEp-2-cellelinjen, som opprinnelig ble antatt å stamme fra strupehodekreftceller, ble senere identifisert som kontaminert med HeLa-celler, en cellelinje som stammer fra livmorhalskreft, ved hjelp av DNA-fingeravtrykk og tilstedeværelsen av HeLa-markørkromosomer.

Til tross for dette brukes HEp-2-cellelinjen fortsatt i stor utstrekning i indirekte immunfluorescens for å påvise antinukleære antistoffer (ANA), som er avgjørende for å diagnostisere tilstander som systemisk lupus erythematosus og systemisk sklerose. Den indirekte immunfluorescensanalysen (IIFA) med HEp-2-celler, som gir klare positive eller negative resultater, er standardmetoden for å teste antinukleære antistoffer. Denne enkle metoden er avgjørende for diagnostisering og klassifisering av ulike systemiske autoimmune sykdommer.

Mønstrene av autoantistoffer som observeres ved indirekte immunfluorescens på HEp-2-celler, spesielt i forbindelse med revmatologi, gir uvurderlig innsikt i ulike revmatiske sykdommer. Den omfattende gjennomgangen av antigener som uttrykkes av HEp-2-celler under ulike dyrkingsforhold, gjør det dessuten mulig å identifisere spesifikke ANA-er knyttet til sykdommer som lupus.

Selv om kontamineringen av cellelinjer som HEp-2 med HeLa-celler har ført til bekymring i kreftforskningen når det gjelder nøyaktigheten og påliteligheten av resultatene og deres kliniske relevans, understreker Hep-2s nytteverdi ved påvisning av antinukleære antistoffer og dens anvendelse på tvers av ulike forskningsdisipliner at den fortsatt er viktig. HEp-2-cellelinjen er et viktig verktøy i blant annet diagnostisering og klassifisering av autoimmune sykdommer.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring