
- Тъкан
- Ларинкс
- Заболяване
- Аденокарцином
- Синоними
- Hep-2, HEP-2, HEp-2/HeLa, Hep 2, Hep2, HEp2, HEP2, H.Ep.-2, H.Ep. #2, H.Ep. No. 2, Hep II, Human Epidermoid carcinoma #2, Human Epithelioma-2
Документи
HEp-2
Cell line · Номер на продукта 300397
The HEp-2 cell line, originally believed to be derived from laryngeal cancer cells, was later identified through DNA fingerprinting and the presence of He...
Персонализиране / Препоръки
- HEp-2Cell line€430.00
Препоръчани (най-новата партида)
01Обща информация
- Описание
Клетъчната линия HEp-2, за която първоначално се смята, че е получена от клетки на рак на ларинкса, по-късно е идентифицирана чрез ДНК отпечатъци и наличие на маркерни хромозоми HeLa като заразена с клетки HeLa - клетъчна линия, получена от рак на маточната шийка.
Въпреки това клетъчната линия HEp-2 продължава да се използва широко в индиректната имунофлуоресценция за откриване на антинуклеарни антитела (АНА), които са ключови при диагностицирането на състояния като системен лупус еритематозус и системна склероза. Стандартният метод за изследване на антинуклеарни антитела е индиректният имунофлуоресцентен анализ (IIFA) с използване на HEp-2 клетки, който дава ясни положителни или отрицателни резултати. Този прост подход е от решаващо значение за диагностицирането и класифицирането на различните системни автоимунни заболявания.
Моделите на автоантителата, наблюдавани при индиректна имунофлуоресценция върху HEp-2 клетки, особено в контекста на ревматологията, осигуряват безценни прозрения за различните ревматични заболявания. Освен това изчерпателният преглед на антигените, експресирани от HEp-2 човешки клетки при различни условия на култивиране, позволява идентифицирането на специфични ANAs, свързани със заболявания като лупус.
В заключение, въпреки че замърсяването на клетъчни линии като HEp-2 с HeLa клетки предизвика загриженост в изследванията на рака относно точността и надеждността на резултатите и тяхната клинична значимост, полезността на Hep-2 при откриването на антинуклеарни антитела и приложението ѝ в различни изследователски дисциплини подчертава нейното продължаващо значение. Клетъчната линия HEp-2 служи като основен инструмент при диагностицирането и класифицирането на автоимунни заболявания, наред с други приложения.
- Тъкан
- Ларинкс
- Заболяване
- Аденокарцином
- Приложения
- В ревматологията индиректната имунофлуоресценция с използване на HEp-2 клетки играе ключова роля при диагностицирането на автоимунни заболявания, включително системен лупус еритематозус и системна склероза
- Синоними
- Hep-2
- HEP-2
- HEp-2/HeLa
- Hep 2
- Hep2
- HEp2
- HEP2
- H.Ep.-2
- H.Ep. #2
- H.Ep. No. 2
- Hep II
- Human Epidermoid carcinoma #2
- Human Epithelioma-2
02Класификация
- Организъм
- Човек
- Секс
- Женски
- Свойства, свързани с растежа
- Привърженик
- Ниво на биологична безопасност
- 1
03Характеристики
- Морфология
- Подобни на епител
04Идентификатори
- Източник
- HEp-2 (каталожен номер 300397 на Cytion)
- Данъчен идентификационен номер в NCBI
- 9606
- Целозавър
- CVCL_1906
05Проява и предразположеност
- Изоензими
- G6PD, A
- Обратна транскриптаза
- Отрицателен
- Продукти
- Кератин
06Обработка и отглеждане
- Хранителна среда
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
- Атмосфера за инкубация
37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.
- Добавки
- Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
- Реагент за дисоциация
- Accutase
- Пресаждане
- Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
- Плътност на засяването
- 1 x 104 клетки/cm2
- Обновяване на течността
- 2 до 3 пъти седмично
- Възстановяване след размразяване
- След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
- Размразяване и култивиране
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Контрол на качеството и криоконсервация
- Стерилност
Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.
За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.
- Среда за замразяване
- Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
- Условия за съхранение
За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.
- Условия за доставка
Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
08Дарител
- Възраст на донора
- 30 години
- Етническа принадлежност
- Афроамериканец
09Правни въпроси и безопасност
- Мерки за безопасност
- Когато планирате да съхранявате криопрепарат в течен азот за бъдещо размразяване, е задължително да спазвате строги мерки за безопасност. Подходящите защитни ръкавици и облекло са от съществено значение, а по време на прехвърлянето на замразени проби към или от резервоара с течен азот е необходимо да се използва маска за лице или предпазни очила. Това се прави, за да се намали рискът от нараняване от потенциални експлозии на криовиолите при изваждането им, които могат да доведат до изхвърляне на остри фрагменти.
- Гаранция
Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа
За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация
- Необходимо е споразумение за прехвърляне на материали
- Да