Премини към съдържанието
HEp-2
Тъкан
Ларинкс
Заболяване
Аденокарцином
Синоними
Hep-2, HEP-2, HEp-2/HeLa, Hep 2, Hep2, HEp2, HEP2, H.Ep.-2, H.Ep. #2, H.Ep. No. 2, Hep II, Human Epidermoid carcinoma #2, Human Epithelioma-2

Документи

HEp-2

Cell line · Номер на продукта 300397

The HEp-2 cell line, originally believed to be derived from laryngeal cancer cells, was later identified through DNA fingerprinting and the presence of He...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия HEp-2, за която първоначално се смята, че е получена от клетки на рак на ларинкса, по-късно е идентифицирана чрез ДНК отпечатъци и наличие на маркерни хромозоми HeLa като заразена с клетки HeLa - клетъчна линия, получена от рак на маточната шийка.

Въпреки това клетъчната линия HEp-2 продължава да се използва широко в индиректната имунофлуоресценция за откриване на антинуклеарни антитела (АНА), които са ключови при диагностицирането на състояния като системен лупус еритематозус и системна склероза. Стандартният метод за изследване на антинуклеарни антитела е индиректният имунофлуоресцентен анализ (IIFA) с използване на HEp-2 клетки, който дава ясни положителни или отрицателни резултати. Този прост подход е от решаващо значение за диагностицирането и класифицирането на различните системни автоимунни заболявания.

Моделите на автоантителата, наблюдавани при индиректна имунофлуоресценция върху HEp-2 клетки, особено в контекста на ревматологията, осигуряват безценни прозрения за различните ревматични заболявания. Освен това изчерпателният преглед на антигените, експресирани от HEp-2 човешки клетки при различни условия на култивиране, позволява идентифицирането на специфични ANAs, свързани със заболявания като лупус.

В заключение, въпреки че замърсяването на клетъчни линии като HEp-2 с HeLa клетки предизвика загриженост в изследванията на рака относно точността и надеждността на резултатите и тяхната клинична значимост, полезността на Hep-2 при откриването на антинуклеарни антитела и приложението ѝ в различни изследователски дисциплини подчертава нейното продължаващо значение. Клетъчната линия HEp-2 служи като основен инструмент при диагностицирането и класифицирането на автоимунни заболявания, наред с други приложения.

Тъкан
Ларинкс
Заболяване
Аденокарцином
Приложения
В ревматологията индиректната имунофлуоресценция с използване на HEp-2 клетки играе ключова роля при диагностицирането на автоимунни заболявания, включително системен лупус еритематозус и системна склероза
Синоними
  • Hep-2
  • HEP-2
  • HEp-2/HeLa
  • Hep 2
  • Hep2
  • HEp2
  • HEP2
  • H.Ep.-2
  • H.Ep. #2
  • H.Ep. No. 2
  • Hep II
  • Human Epidermoid carcinoma #2
  • Human Epithelioma-2

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител

04Идентификатори

Източник
HEp-2 (каталожен номер 300397 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1906

05Проява и предразположеност

Изоензими
G6PD, A
Обратна транскриптаза
Отрицателен
Продукти
Кератин

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
30 години
Етническа принадлежност
Афроамериканец