HEp-2

La linea cellulare HEp-2, originariamente ritenuta derivata da cellule di cancro della laringe, è stata successivamente identificata attraverso il DNA fingerprinting e la presenza di cromosomi marcatori HeLa come contaminata da cellule HeLa, una linea cellulare derivata dal cancro della cervice.

Ciononostante, la linea cellulare HEp-2 continua a essere ampiamente utilizzata nell'immunofluorescenza indiretta per rilevare gli anticorpi antinucleari (ANA), fondamentali per la diagnosi di condizioni come il lupus eritematoso sistemico e la sclerosi sistemica. Il test di immunofluorescenza indiretta (IIFA) con cellule HEp-2, che fornisce risultati chiaramente positivi o negativi, è il metodo standard per testare gli anticorpi antinucleari. Questo approccio semplice è fondamentale per la diagnosi e la classificazione di diverse malattie autoimmuni sistemiche.

I modelli di autoanticorpi osservati in immunofluorescenza indiretta su cellule HEp-2, soprattutto nel contesto della reumatologia, forniscono preziose informazioni su varie malattie reumatiche. Inoltre, la rassegna completa degli antigeni espressi dalle cellule umane HEp-2 in diverse condizioni di coltura consente di identificare gli ANA specifici legati a malattie come il lupus.

In conclusione, mentre la contaminazione di linee cellulari come HEp-2 con cellule HeLa ha suscitato preoccupazioni nella ricerca sul cancro per quanto riguarda l'accuratezza e l'affidabilità dei risultati e la loro rilevanza clinica, l'utilità di Hep-2 nella rilevazione di anticorpi antinucleari e la sua applicazione in diverse discipline di ricerca sottolineano la sua continua importanza. La linea cellulare HEp-2 è uno strumento essenziale per la diagnosi e la classificazione delle malattie autoimmuni, tra le altre applicazioni.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia