HEp-2

HEp-2-cellelinjen, som man oprindeligt troede stammede fra larynxcancerceller, blev senere identificeret ved hjælp af DNA-fingeraftryk og tilstedeværelsen af HeLa-markørkromosomer som værende forurenet med HeLa-celler, en cellelinje, der stammede fra livmoderhalskræft.

På trods af dette bruges HEp-2-cellelinjen stadig i vid udstrækning i indirekte immunfluorescens til at påvise antinukleære antistoffer (ANA'er), som er nøglen til at diagnosticere tilstande som systemisk lupus erythematosus og systemisk sklerose. Det indirekte immunfluorescensassay (IIFA) ved hjælp af HEp-2-celler, som giver klare positive eller negative resultater, er standardmetoden til testning af antinukleære antistoffer. Denne enkle tilgang er afgørende for at kunne diagnosticere og klassificere forskellige systemiske autoimmune sygdomme.

De mønstre af autoantistoffer, der observeres ved indirekte immunfluorescens på HEp-2-celler, især i forbindelse med reumatologi, giver uvurderlig indsigt i forskellige reumatiske sygdomme. Desuden giver den omfattende gennemgang af antigener, der udtrykkes af HEp-2-celler under forskellige dyrkningsbetingelser, mulighed for at identificere specifikke ANA'er, der er forbundet med sygdomme som lupus.

Selvom kontamineringen af cellelinjer som HEp-2 med HeLa-celler har givet anledning til bekymring i kræftforskningen om resultaternes nøjagtighed og pålidelighed og deres kliniske relevans, understreger Hep-2's anvendelighed til påvisning af antinukleære antistoffer og dens anvendelse på tværs af forskellige forskningsdiscipliner dens fortsatte betydning. HEp-2-cellelinjen er blandt andet et vigtigt værktøj til diagnosticering og klassificering af autoimmune sygdomme.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring