Μετάβαση στο περιεχόμενο
HEp-2
Ιστός
Λάρυγγας
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα
Συνώνυμα
Hep-2, HEP-2, HEp-2/HeLa, Hep 2, Hep2, HEp2, HEP2, H.Ep.-2, H.Ep. #2, H.Ep. No. 2, Hep II, Human Epidermoid carcinoma #2, Human Epithelioma-2

Έγγραφα

HEp-2

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300397

The HEp-2 cell line, originally believed to be derived from laryngeal cancer cells, was later identified through DNA fingerprinting and the presence of He...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά HEp-2, η οποία αρχικά θεωρήθηκε ότι προέρχεται από κύτταρα καρκίνου του λάρυγγα, αναγνωρίστηκε αργότερα μέσω δακτυλικών αποτυπωμάτων DNA και της παρουσίας χρωμοσωμάτων-δεικτών HeLa ως μολυσμένη με κύτταρα HeLa, μια κυτταρική σειρά που προέρχεται από καρκίνο του τραχήλου της μήτρας.

Παρά το γεγονός αυτό, η κυτταρική σειρά HEp-2 εξακολουθεί να χρησιμοποιείται εκτενώς στον έμμεσο ανοσοφθορισμό για την ανίχνευση αντιπυρηνικών αντισωμάτων (ANA), τα οποία αποτελούν κλειδί για τη διάγνωση καταστάσεων όπως ο συστηματικός ερυθηματώδης λύκος και η συστηματική σκλήρυνση. Η δοκιμασία έμμεσου ανοσοφθορισμού (IIFA) με χρήση κυττάρων HEp-2, η οποία παρέχει σαφή θετικά ή αρνητικά αποτελέσματα, αποτελεί την τυπική μέθοδο για τον έλεγχο των αντιπυρηνικών αντισωμάτων. Αυτή η απλή προσέγγιση είναι ζωτικής σημασίας για τη διάγνωση και την ταξινόμηση των διαφόρων συστηματικών αυτοάνοσων νοσημάτων.

Τα μοτίβα των αυτοαντισωμάτων που παρατηρούνται στον έμμεσο ανοσοφθορισμό σε κύτταρα HEp-2, ιδίως στο πλαίσιο της ρευματολογίας, παρέχουν ανεκτίμητες πληροφορίες για διάφορες ρευματικές παθήσεις. Επιπλέον, η ολοκληρωμένη επισκόπηση των αντιγόνων που εκφράζονται από τα ανθρώπινα κύτταρα HEp-2 υπό διαφορετικές συνθήκες καλλιέργειας επιτρέπει τον εντοπισμό συγκεκριμένων ANAs που συνδέονται με ασθένειες όπως ο λύκος.

Συμπερασματικά, ενώ η επιμόλυνση κυτταρικών σειρών όπως η HEp-2 με κύτταρα HeLa έχει προκαλέσει ανησυχίες στην έρευνα για τον καρκίνο σχετικά με την ακρίβεια και την αξιοπιστία των αποτελεσμάτων και την κλινική τους σημασία, η χρησιμότητα της Hep-2 στην ανίχνευση αντιπυρηνικών αντισωμάτων και η εφαρμογή της σε διάφορους ερευνητικούς κλάδους υπογραμμίζουν τη συνεχιζόμενη σημασία της. Η κυτταρική σειρά HEp-2 χρησιμεύει ως βασικό εργαλείο για τη διάγνωση και την ταξινόμηση αυτοάνοσων νοσημάτων, μεταξύ άλλων εφαρμογών.

Ιστός
Λάρυγγας
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα
Εφαρμογές
Στη ρευματολογία, ο έμμεσος ανοσοφθορισμός με τη χρήση κυττάρων HEp-2 διαδραματίζει καθοριστικό ρόλο στη διάγνωση αυτοάνοσων νοσημάτων, συμπεριλαμβανομένου του συστηματικού ερυθηματώδους λύκου και της συστηματικής σκλήρυνσης
Συνώνυμα
  • Hep-2
  • HEP-2
  • HEp-2/HeLa
  • Hep 2
  • Hep2
  • HEp2
  • HEP2
  • H.Ep.-2
  • H.Ep. #2
  • H.Ep. No. 2
  • Hep II
  • Human Epidermoid carcinoma #2
  • Human Epithelioma-2

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HEp-2 (αριθμός καταλόγου Cytion 300397)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_1906

05Έκφραση και ευαισθησία

Ισοένζυμα
G6PD, A
Αντίστροφη μεταγραφάση
Αρνητικό
Προϊόντα
Κερατίνη

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (αριθμός άρθρου Cytion 820100a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS και 1% NEAA
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
30 χρόνια
Εθνικότητα
Αφροαμερικανός