HEp-2

A linha celular HEp-2, que originalmente se acreditava ser derivada de células cancerígenas da laringe, foi mais tarde identificada através de impressões digitais de ADN e da presença de cromossomas marcadores HeLa como estando contaminada com células HeLa, uma linha celular derivada do cancro do colo do útero.

Apesar disso, a linha celular HEp-2 continua a ser amplamente utilizada na imunofluorescência indireta para detetar anticorpos antinucleares (ANAs), que são fundamentais no diagnóstico de doenças como o lúpus eritematoso sistémico e a esclerose sistémica. O ensaio de imunofluorescência indireta (IIFA) utilizando células HEp-2, que fornece resultados positivos ou negativos claros, é o método padrão para testar os anticorpos antinucleares. Esta abordagem simples é crucial para o diagnóstico e a classificação de diferentes doenças auto-imunes sistémicas.

Os padrões de auto-anticorpos observados na imunofluorescência indireta em células HEp-2, especialmente no contexto da reumatologia, fornecem informações valiosas sobre várias doenças reumáticas. Além disso, a revisão exaustiva dos antigénios expressos pelas células humanas HEp-2 em diferentes condições de cultura permite a identificação de ANAs específicos ligados a doenças como o lúpus.

Em conclusão, embora a contaminação de linhas celulares como a HEp-2 com células HeLa tenha suscitado preocupações na investigação do cancro quanto à exatidão e fiabilidade dos resultados e à sua relevância clínica, a utilidade da Hep-2 na deteção de anticorpos antinucleares e a sua aplicação em várias disciplinas de investigação sublinham a sua importância contínua. A linha celular HEp-2 é uma ferramenta essencial no diagnóstico e classificação de doenças auto-imunes, entre outras aplicações.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia