HEp-2

De HEp-2 cellijn, waarvan oorspronkelijk gedacht werd dat deze afkomstig was van laryngeale kankercellen, werd later via DNA fingerprinting en de aanwezigheid van HeLa markerchromosomen geïdentificeerd als zijnde besmet met HeLa cellen, een cellijn die afkomstig was van baarmoederhalskanker.

Desondanks wordt de HEp-2 cellijn nog steeds veel gebruikt in indirecte immunofluorescentie om antinucleaire antilichamen (ANA's) te detecteren, die belangrijk zijn bij de diagnose van aandoeningen zoals systemische lupus erythematosus en systemische sclerose. De indirecte immunofluorescentietest (IIFA) met HEp-2 cellen, die duidelijk positieve of negatieve resultaten oplevert, is de standaardmethode voor het testen van antinucleaire antilichamen. Deze eenvoudige aanpak is cruciaal voor het diagnosticeren en classificeren van verschillende systemische auto-immuunziekten.

De patronen van autoantilichamen die worden waargenomen bij indirecte immunofluorescentie op HEp-2 cellen, vooral in de context van reumatologie, bieden inzichten van onschatbare waarde in verschillende reumatische ziekten. Bovendien maakt het uitgebreide overzicht van antigenen die tot expressie komen in HEp-2 cellen onder verschillende kweekomstandigheden het mogelijk om specifieke ANA's te identificeren die gekoppeld zijn aan ziekten zoals lupus.

Concluderend kan worden gesteld dat, hoewel de vervuiling van cellijnen zoals HEp-2 met HeLa-cellen heeft geleid tot bezorgdheid in kankeronderzoek over de nauwkeurigheid en betrouwbaarheid van resultaten en hun klinische relevantie, het nut van HEp-2 in de detectie van antinucleaire antilichamen en de toepassing ervan in verschillende onderzoeksdisciplines het blijvende belang ervan onderstrepen. De HEp-2 cellijn is een essentieel hulpmiddel bij het diagnosticeren en classificeren van onder andere auto-immuunziekten.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring