- Audinys
- Gerklos
- Liga
- Adenokarcinoma
- Sinonimai
- Hep-2, HEP-2, HEp-2/HeLa, Hep 2, Hep2, HEp2, HEP2, H.Ep.-2, H.Ep. #2, H.Ep. No. 2, Hep II, Human Epidermoid carcinoma #2, Human Epithelioma-2
Dokumentai
HEp-2
Cell line · Prekės numeris 300397
The HEp-2 cell line, originally believed to be derived from laryngeal cancer cells, was later identified through DNA fingerprinting and the presence of He...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- HEp-2Cell line€430.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
Iš pradžių manyta, kad HEp-2 ląstelių linija, gauta iš gerklų vėžio ląstelių, vėliau pagal DNR pirštų atspaudus ir HeLa chromosomų žymenų buvimą nustatyta, kad ji užkrėsta HeLa ląstelėmis, gautomis iš gimdos kaklelio vėžio.
Nepaisant to, HEp-2 ląstelių linija ir toliau plačiai naudojama netiesioginei imunofluorescencijai, siekiant nustatyti antinuklearinius antikūnus (ANA), kurie yra labai svarbūs diagnozuojant tokias ligas kaip sisteminė raudonoji vilkligė ir sisteminė sklerozė. Netiesioginės imunofluorescencijos tyrimas (TIFA) naudojant HEp-2 ląsteles, kuris duoda aiškius teigiamus arba neigiamus rezultatus, yra standartinis antinuklearinių antikūnų tyrimo metodas. Šis paprastas metodas yra labai svarbus diagnozuojant ir klasifikuojant įvairias sistemines autoimunines ligas.
Netiesioginės imunofluorescencijos būdu ant HEp-2 ląstelių stebimi autoantikūnų modeliai, ypač reumatologijos kontekste, suteikia neįkainojamų įžvalgų apie įvairias reumatines ligas. Be to, išsami antigenų, kuriuos žmogaus HEp-2 ląstelės išreiškia skirtingomis kultūros sąlygomis, apžvalga leidžia nustatyti specifinius ANA, susijusius su tokiomis ligomis kaip vilkligė.
Apibendrinant galima teigti, kad nors tokių ląstelių linijų, kaip HEp-2, užterštumas HeLa ląstelėmis sukėlė susirūpinimą vėžio tyrimų srityje dėl rezultatų tikslumo ir patikimumo bei jų klinikinės reikšmės, Hep-2 naudingumas nustatant antinuklearinius antikūnus ir jos taikymas įvairiose mokslinių tyrimų srityse pabrėžia jos nuolatinę svarbą. HEp-2 ląstelių linija, be kita ko, yra labai svarbi priemonė diagnozuojant ir klasifikuojant autoimunines ligas.
- Audinys
- Gerklos
- Liga
- Adenokarcinoma
- Paraiškos
- Reumatologijoje netiesioginė imunofluorescencija, naudojant HEp-2 ląsteles, yra labai svarbi diagnozuojant autoimunines ligas, įskaitant sisteminę raudonąją vilkligę ir sisteminę sklerozę
- Sinonimai
- Hep-2
- HEP-2
- HEp-2/HeLa
- Hep 2
- Hep2
- HEp2
- HEP2
- H.Ep.-2
- H.Ep. #2
- H.Ep. No. 2
- Hep II
- Human Epidermoid carcinoma #2
- Human Epithelioma-2
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Moteris
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Į epitelį panašus
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- HEp-2 (Cytion katalogo numeris 300397)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1906
05Išraiška ir jautrumas
- Izofermentai
- G6PD, A
- Atvirkštinė transkriptazė
- Neigiamas
- Produktai
- Keratinas
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Sėjos tankis
- 1 x 104 ląstelės/cm2
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atkūrimas po atšilimo
- Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Donoro amžius
- 30 metų
- Etninė priklausomybė
- Afroamerikietis
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip