HEp-2

HEp-2-cellinjen, som ursprungligen troddes härröra från larynxcancerceller, identifierades senare genom DNA-fingeravtryck och förekomsten av HeLa-markörkromosomer som kontaminerad med HeLa-celler, en cellinje som härrör från livmoderhalscancer.

Trots detta används HEp-2-cellinjen fortfarande i stor utsträckning vid indirekt immunofluorescens för att påvisa antinukleära antikroppar (ANA), som är viktiga för att diagnostisera tillstånd som systemisk lupus erythematosus och systemisk skleros. Den indirekta immunfluorescensanalysen (IIFA) med HEp-2-celler, som ger tydliga positiva eller negativa resultat, är standardmetoden för att testa antinukleära antikroppar. Denna enkla metod är avgörande för att diagnostisera och klassificera olika systemiska autoimmuna sjukdomar.

De mönster av autoantikroppar som observeras vid indirekt immunfluorescens på HEp-2-celler, särskilt i samband med reumatologi, ger ovärderliga insikter i olika reumatiska sjukdomar. Den omfattande genomgången av antigener som uttrycks av HEp-2-celler från människa under olika odlingsförhållanden gör det dessutom möjligt att identifiera specifika ANA som är kopplade till sjukdomar som lupus.

Sammanfattningsvis kan sägas att även om kontamineringen av cellinjer som HEp-2 med HeLa-celler har lett till oro inom cancerforskningen över resultatens noggrannhet och tillförlitlighet och deras kliniska relevans, understryker användbarheten av Hep-2 vid detektion av antinukleära antikroppar och dess tillämpning inom olika forskningsdiscipliner dess fortsatta betydelse. HEp-2-cellinjen är bland annat ett viktigt verktyg för att diagnostisera och klassificera autoimmuna sjukdomar.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring