Перейти до вмісту
HEp-2
Тканина
Гортань
Хвороба
Аденокарцинома
Синоніми
Hep-2, HEP-2, HEp-2/HeLa, Hep 2, Hep2, HEp2, HEP2, H.Ep.-2, H.Ep. #2, H.Ep. No. 2, Hep II, Human Epidermoid carcinoma #2, Human Epithelioma-2

Документи

HEp-2

Cell line · Номер товару 300397

The HEp-2 cell line, originally believed to be derived from laryngeal cancer cells, was later identified through DNA fingerprinting and the presence of He...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія HEp-2, яка спочатку вважалася похідною від клітин раку гортані, пізніше була ідентифікована за допомогою ДНК-дактилоскопії та наявності маркерних хромосом HeLa як контамінована з клітинами HeLa, клітинною лінією, яка була отримана від раку шийки матки.

Незважаючи на це, клітинна лінія HEp-2 продовжує широко використовуватися в непрямій імунофлуоресценції для виявлення антинуклеарних антитіл (ANA), які є ключовими в діагностиці таких захворювань, як системний червоний вовчак і системний склероз. Аналіз непрямої імунофлуоресценції (IIFA) з використанням клітин HEp-2, який дає чіткі позитивні або негативні результати, є стандартним методом тестування антинуклеарних антитіл. Цей простий підхід має вирішальне значення для діагностики та класифікації різних системних аутоімунних захворювань.

Патерни аутоантитіл, що спостерігаються в непрямій імунофлуоресценції на клітинах HEp-2, особливо в контексті ревматології, дають неоціненну інформацію про різні ревматичні захворювання. Крім того, всебічний огляд антигенів, що експресуються клітинами HEp-2 людини за різних умов культивування, дозволяє ідентифікувати специфічні АНА, пов'язані з такими захворюваннями, як вовчак.

На закінчення, хоча контамінація клітинних ліній, таких як HEp-2, клітинами HeLa викликає занепокоєння в дослідженнях раку щодо точності і надійності результатів та їх клінічної значущості, корисність Hep-2 для виявлення антинуклеарних антитіл і його застосування в різних дослідницьких дисциплінах підкреслюють його незмінну важливість. Клітинна лінія HEp-2 слугує важливим інструментом у діагностиці та класифікації аутоімунних захворювань, серед інших застосувань.

Тканина
Гортань
Хвороба
Аденокарцинома
Застосування
У ревматології непряма імунофлуоресценція з використанням клітин HEp-2 відіграє вирішальну роль у діагностиці аутоімунних захворювань, зокрема системного червоного вовчака та системного склерозу
Синоніми
  • Hep-2
  • HEP-2
  • HEp-2/HeLa
  • Hep 2
  • Hep2
  • HEp2
  • HEP2
  • H.Ep.-2
  • H.Ep. #2
  • H.Ep. No. 2
  • Hep II
  • Human Epidermoid carcinoma #2
  • Human Epithelioma-2

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні

04Ідентифікатори

Посилання
HEp-2 (номер за каталогом Cytion 300397)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_1906

05Експресія та сприйнятливість

Ізоферменти
G6PD, A
Зворотна транскриптаза
Негативно
Продукція
Кератин

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
1 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 24 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
30 років
Етнічна приналежність
Афроамериканець