HEp-2

Die HEp-2-Zelllinie, von der ursprünglich angenommen wurde, dass sie von Kehlkopfkrebszellen stammt, wurde später durch DNA-Fingerprinting und das Vorhandensein von HeLa-Markerchromosomen als mit HeLa-Zellen kontaminiert identifiziert, einer Zelllinie, die von Gebärmutterhalskrebs stammt.

Trotzdem wird die HEp-2-Zelllinie nach wie vor in großem Umfang für die indirekte Immunfluoreszenz zum Nachweis antinukleärer Antikörper (ANA) verwendet, die bei der Diagnose von Krankheiten wie systemischem Lupus erythematodes und systemischer Sklerose von entscheidender Bedeutung sind. Der indirekte Immunfluoreszenztest (IIFA) unter Verwendung von HEp-2-Zellen, der eindeutig positive oder negative Ergebnisse liefert, ist die Standardmethode für den Nachweis antinukleärer Antikörper. Dieser unkomplizierte Ansatz ist für die Diagnose und Klassifizierung verschiedener systemischer Autoimmunerkrankungen von entscheidender Bedeutung.

Die bei der indirekten Immunfluoreszenz auf HEp-2-Zellen beobachteten Autoantikörpermuster liefern insbesondere im Zusammenhang mit der Rheumatologie unschätzbare Erkenntnisse über verschiedene rheumatische Erkrankungen. Darüber hinaus ermöglicht die umfassende Übersicht über die von menschlichen HEp-2-Zellen unter verschiedenen Kulturbedingungen exprimierten Antigene die Identifizierung spezifischer ANAs, die mit Krankheiten wie Lupus in Verbindung stehen.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die Kontamination von Zelllinien wie HEp-2 mit HeLa-Zellen in der Krebsforschung zwar zu Bedenken hinsichtlich der Genauigkeit und Zuverlässigkeit der Ergebnisse und ihrer klinischen Relevanz geführt hat, der Nutzen von Hep-2 für den Nachweis antinukleärer Antikörper und seine Anwendung in verschiedenen Forschungsdisziplinen jedoch seine anhaltende Bedeutung unterstreichen. Die HEp-2-Zelllinie ist unter anderem ein wichtiges Instrument für die Diagnose und Klassifizierung von Autoimmunkrankheiten.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung