HEp-2

Linia komórkowa HEp-2, pierwotnie uważana za pochodzącą z komórek raka krtani, została później zidentyfikowana poprzez odciski palców DNA i obecność chromosomów markerowych HeLa jako zanieczyszczona komórkami HeLa, linią komórkową pochodzącą z raka szyjki macicy.

Pomimo tego, linia komórkowa HEp-2 jest nadal szeroko wykorzystywana w immunofluorescencji pośredniej do wykrywania przeciwciał przeciwjądrowych (ANA), które są kluczowe w diagnozowaniu chorób takich jak toczeń rumieniowaty układowy i twardzina układowa. Test immunofluorescencji pośredniej (IIFA) z wykorzystaniem komórek HEp-2, który zapewnia wyraźne pozytywne lub negatywne wyniki, jest standardową metodą badania przeciwciał przeciwjądrowych. To proste podejście ma kluczowe znaczenie dla diagnozowania i klasyfikowania różnych ogólnoustrojowych chorób autoimmunologicznych.

Wzory autoprzeciwciał obserwowane w immunofluorescencji pośredniej na komórkach HEp-2, szczególnie w kontekście reumatologii, zapewniają nieoceniony wgląd w różne choroby reumatyczne. Co więcej, kompleksowy przegląd antygenów wyrażanych przez ludzkie komórki HEp-2 w różnych warunkach hodowli umożliwia identyfikację specyficznych ANA związanych z chorobami takimi jak toczeń.

Podsumowując, podczas gdy zanieczyszczenie linii komórkowych takich jak HEp-2 komórkami HeLa wywołało obawy w badaniach nad rakiem dotyczące dokładności i wiarygodności wyników oraz ich znaczenia klinicznego, użyteczność Hep-2 w wykrywaniu przeciwciał przeciwjądrowych i jego zastosowanie w różnych dyscyplinach badawczych podkreślają jego ciągłe znaczenie. Linia komórkowa HEp-2 służy jako podstawowe narzędzie w diagnozowaniu i klasyfikacji chorób autoimmunologicznych, wśród innych zastosowań.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym