HEp-2

HEp-2細胞株はもともと喉頭がん細胞由来と信じられていたが、後にDNAフィンガープリンティングとHeLaマーカー染色体の存在によって、子宮頸がん由来の細胞株であるHeLa細胞に汚染されていることが同定された。

にもかかわらず、HEp-2細胞株は、全身性エリテマトーデスや全身性硬化症のような疾患の診断の鍵となる抗核抗体（ANA）を検出するための間接免疫蛍光法において、広く利用されている。HEp-2細胞を用いた間接免疫蛍光法(IIFA)は、明確な陽性または陰性の結果が得られ、抗核抗体を検査するための標準的な方法である。この簡便な方法は、様々な全身性自己免疫疾患の診断と分類に極めて重要である。

HEp-2細胞上の間接免疫蛍光法で観察される自己抗体のパターンは、特にリウマチ学との関連において、様々なリウマチ性疾患に対する貴重な洞察を与えてくれる。さらに、異なる培養条件下でHEp-2ヒト細胞によって発現された抗原を包括的に検討することにより、ループスのような疾患に関連する特異的ANAを同定することができる。

結論として、HEp-2のような細胞株がHeLa細胞で汚染されていることは、がん研究において、結果の正確性と信頼性、そして臨床的妥当性についての懸念を促しているが、抗核抗体の検出におけるHep-2の有用性と、様々な研究分野にわたるその応用は、その継続的な重要性を強調している。HEp-2細胞株は、特に自己免疫疾患の診断と分類に不可欠なツールである。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。