HEp-2

Başlangıçta gırtlak kanseri hücrelerinden türetildiği düşünülen HEp-2 hücre hattının daha sonra DNA parmak izi ve HeLa işaret kromozomlarının varlığı yoluyla rahim ağzı kanserinden türetilen bir hücre hattı olan HeLa hücreleriyle kontamine olduğu tespit edilmiştir.

Buna rağmen, HEp-2 hücre hattı, sistemik lupus eritematozus ve sistemik skleroz gibi durumların teşhisinde anahtar rol oynayan antinükleer antikorları (ANA) tespit etmek için dolaylı immünofloresan yönteminde yaygın olarak kullanılmaya devam etmektedir. Net pozitif veya negatif sonuçlar veren HEp-2 hücreleri kullanılarak yapılan indirekt immünofloresan testi (IIFA), antinükleer antikorları test etmek için standart yöntemdir. Bu basit yaklaşım, farklı sistemik otoimmün hastalıkların teşhisi ve sınıflandırılması için çok önemlidir.

HEp-2 hücreleri üzerinde indirekt immünofloresan yöntemiyle gözlemlenen otoantikor örüntüleri, özellikle romatoloji bağlamında, çeşitli romatizmal hastalıklar hakkında çok değerli bilgiler sağlamaktadır. Ayrıca, farklı kültür koşulları altında HEp-2 insan hücreleri tarafından ifade edilen antijenlerin kapsamlı bir şekilde incelenmesi, lupus gibi hastalıklarla bağlantılı spesifik ANA'ların tanımlanmasını sağlar.

Sonuç olarak, HEp-2 gibi hücre hatlarının HeLa hücreleriyle kontaminasyonu, kanser araştırmalarında sonuçların doğruluğu ve güvenilirliği ile klinik uygunlukları konusunda endişelere yol açmış olsa da, Hep-2'nin antinükleer antikorların saptanmasındaki faydası ve çeşitli araştırma disiplinlerinde uygulanması, devam eden öneminin altını çizmektedir. HEp-2 hücre hattı, diğer uygulamaların yanı sıra otoimmün hastalıkların teşhisinde ve sınıflandırılmasında önemli bir araç olarak hizmet vermektedir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın