İçeriğe atla
HROC300 T2 M1
Doku
Kolorektal
Hastalık
Adenokarsinom, TNM evresi T4aN1bM1R2L0V1, derecelendirme G2, Lk(n) + 3, ∑ Lk(n) 22
Metastaz yeri
Uzak metastaz mevcuttur (TNM M1; evre T4aN1bM1R2)

HROC300 T2 M1

Cell line · Ürün numarası 300866

HROC300 T2 M1, HROC (Hansestadt R...) kapsamında bir yetişkin hastadan rezeke edilen bir primer tümör örneğinden elde edilen bir insan kolorektal karsinom hücre hattıdır...

€800.00vergi ve kargo hariç
Sipariş üzerine üretilir
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HROC300 T2 M1, HROC (Hansestadt Rostock Kolorektal Kanser) model koleksiyonunda yer alan yetişkin bir hastadan rezeke edilen primer tümör örneğinden elde edilen bir insan kolorektal karsinom hücre hattıdır. "T2" adı, tümörün ikinci bir cerrahi aşamada elde edildiğini, "M1" ise bu örnekten oluşturulan karşılık gelen in vitro modeli belirtir. HROC platformu, kapsamlı biyobankacılık ile standartlaştırılmış hasta kaynaklı ksenograftlar (PDX) ve kalıcı düşük geçişli hücre hatlarının oluşturulmasını entegre ederek, ardışık kolorektal kanser vakalarından moleküler olarak anotlanmış tümör modellerinin oluşturulmasını sağlar.

HROC300 T2 M1'in oluşturulması, taze rezeke edilmiş tümör dokusunun mekanik olarak ayrıştırılması, tek hücreli süspansiyonlar elde etmek için filtrasyon ve glutamin, antibiyotikler ve antimikotikler ile takviye edilmiş tanımlanmış tümör hücresi kültür ortamında kolajen kaplı kültür plakalarına ekme işlemlerini içeren standart bir protokol izlenerek gerçekleştirilmiştir. HROC kohortunda, denenen kolorektal karsinom örneklerinin yaklaşık %13'ünden kalıcı birincil hücre hatları oluşturuldu ve başarılı kurulum, tek değişkenli analizde daha yüksek tümör derecelendirmesi ve ileri nodal durum ile korele oldu. Çok değişkenli analiz, nodal tutulumun başarılı in vitro model kurulumunun bağımsız bir öngörücüsü olduğunu belirledi. Bu bulgular, başarılı bir şekilde adapte edilmiş kültürler arasında biyolojik olarak agresif fenotiplerin zenginleşmesini yansıtmaktadır.

Daha geniş HROC koleksiyonu içinde, modeller kromozomal instabilite (CIN), CpG ada metilatör fenotipi (CIMP), mikrosatellit stabil (MSS) ve mikrosatellit instabilitesi yüksek (MSI-H) tümörler dahil olmak üzere kolorektal karsinomun tüm ana moleküler alt tiplerini ve KRAS, BRAF, TP53, APC ve PIK3CA gibi genleri etkileyen çeşitli mutasyonel arka planları da kapsar. HROC300 T2 M1, bu titizlikle açıklanmış bağlamda oluşturulmuş olup, eşleşen klinikopatolojik verilerle ve mevcut olduğu durumlarda karşılık gelen PDX materyaliyle entegrasyona olanak sağlamaktadır. Düşük pasajlı, hastadan elde edilen kolorektal karsinom modeli olan HROC300 T2 M1, hassas onkoloji çerçevesi içinde tümör biyolojisi, genotip-fenotip ilişkileri ve preklinik terapötik testler için uygundur.

Doku
Kolorektal
Hastalık
Adenokarsinom, TNM evresi T4aN1bM1R2L0V1, derecelendirme G2, Lk(n) + 3, ∑ Lk(n) 22
Metastaz yeri
Uzak metastaz mevcuttur (TNM M1; evre T4aN1bM1R2)
Uygulamalar
Kolorektal kanser araştırması; MSS kolorektal adenokarsinom; HROC Linnebacher biyobankası; ilaç duyarlılığı; ileri evre kolorektal kanser modellemesi; tümör biyolojisi

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GDO'suz
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Hücre türü
Epitel hücreleri
MSI durumu
MSS

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HROC300 T2 M1 (Cytion katalog numarası 300866)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_VQ94

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
Her 3 ila 5 günde bir
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
73 yıl
Etnik köken
Kafkas