HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1は、HROC（ハンザ都市ロストック大腸癌）モデルコレクション内の成人患者から摘出された原発腫瘍検体由来の人間大腸癌細胞株である。 「T2」の表記は、腫瘍が2回目の外科的採取時点（第2手術時）に得られたことを示し、「M1」は当該検体から樹立された対応するin vitroモデルを意味する。HROCプラットフォームは、包括的なバイオバンキングと患者由来異種移植モデル（PDX）および恒久的な低継代細胞株の標準化生成を統合し、連続する大腸癌症例からの分子注釈付き腫瘍モデルを可能とする。

HROC300 T2 M1の樹立には、新鮮切除腫瘍組織の機械的分散、単一細胞懸濁液を得るための濾過、グルタミン・抗生物質・抗真菌剤添加の定義済み腫瘍細胞培養培地を用いたコラーゲン被覆培養プレートへの播種を含む標準化プロトコルが適用された。 HROCコホート全体では、試行した大腸癌サンプルの約13%から恒久的な初代細胞株が樹立され、単変量解析では樹立成功が腫瘍分化度の高さと進行したリンパ節転移状態と相関した。多変量解析ではリンパ節転移がin vitroモデル樹立成功の独立した予測因子として同定された。これらの知見は、樹立成功した培養株に生物学的に侵襲性の高い表現型が濃縮されていることを反映している。

より広範なHROCコレクション内では、モデルは染色体不安定性（CIN）、CpGアイランドメチル化表現型（CIMP）、マイクロサテライト安定型（MSS）、マイクロサテライト不安定性高（MSI-H）腫瘍を含む大腸癌の主要な分子サブタイプ全てを網羅し、さらにKRAS、 BRAF、TP53、APC、PIK3CAなどの遺伝子に影響を与える多様な変異背景も含まれる。 HROC300 T2 M1は、この厳密に注釈されたコンテキストで生成され、対応する臨床病理学的データ、および入手可能な場合は対応するPDX材料との統合を可能にしています。低継代数の患者由来大腸癌モデルとして、HROC300 T2 M1は、精密腫瘍学の枠組み内での腫瘍生物学、遺伝子型-表現型関連、および前臨床治療試験の研究に適しています。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。