HROC300 Τ2 Μ1

Το HROC300 T2 M1 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του παχέος εντέρου που προέρχεται από δείγμα πρωτογενούς όγκου που αφαιρέθηκε από ενήλικα ασθενή στο πλαίσιο της συλλογής μοντέλων HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). Ο χαρακτηρισμός «T2» υποδηλώνει ότι ο όγκος ελήφθη κατά τη δεύτερη χειρουργική επέμβαση, ενώ «M1» υποδηλώνει το αντίστοιχο in vitro μοντέλο που δημιουργήθηκε από αυτό το δείγμα. Η πλατφόρμα HROC ενσωματώνει ολοκληρωμένη βιοτράπεζα με τυποποιημένη παραγωγή ξενομοσχευμάτων που προέρχονται από ασθενείς (PDX) και μόνιμες κυτταρικές σειρές χαμηλής διέλευσης, επιτρέποντας τη δημιουργία μοριακά σχολιασμένων μοντέλων όγκων από διαδοχικές περιπτώσεις καρκίνου του παχέος εντέρου.

Η δημιουργία του HROC300 T2 M1 ακολούθησε ένα τυποποιημένο πρωτόκολλο που περιελάμβανε μηχανική διάσπαση του πρόσφατα εκτομισθέντος καρκινικού ιστού, διήθηση για την απόκτηση εναιωρημάτων μονών κυττάρων και σπορά σε καλλιεργητικές πλάκες επικαλυμμένες με κολλαγόνο σε καθορισμένο μέσο καλλιέργειας καρκινικών κυττάρων συμπληρωμένο με γλουταμίνη, αντιβιοτικά και αντιμυκητιασικά. Σε ολόκληρη την κοόρτη HROC, μόνιμες πρωτογενείς κυτταρικές σειρές δημιουργήθηκαν από περίπου το 13% των δειγμάτων καρκίνου του παχέος εντέρου που δοκιμάστηκαν, με την επιτυχή δημιουργία να συσχετίζεται σε μονομεταβλητή ανάλυση με υψηλότερη βαθμολογία όγκου και προχωρημένη κατάσταση των λεμφαδένων. Η πολυμεταβλητή ανάλυση προσδιόρισε τη συμμετοχή των λεμφαδένων ως ανεξάρτητο προγνωστικό παράγοντα για την επιτυχή δημιουργία μοντέλου in vitro. Αυτά τα ευρήματα αντικατοπτρίζουν τον εμπλουτισμό των βιολογικά επιθετικών φαινοτύπων μεταξύ των επιτυχώς προσαρμοσμένων καλλιεργειών.

Στο ευρύτερο πλαίσιο της συλλογής HROC, τα μοντέλα περιλαμβάνουν όλους τους κύριους μοριακούς υποτύπους του καρκίνου του παχέος εντέρου, συμπεριλαμβανομένων των όγκων με χρωμοσωμική αστάθεια (CIN), φαινότυπο μεθυλίωσης νησίδων CpG (CIMP), σταθερότητα μικροδορυφόρων (MSS) και υψηλή αστάθεια μικροδορυφόρων (MSI-H), καθώς και ποικίλα μεταλλακτικά υπόβαθρα που επηρεάζουν γονίδια όπως τα KRAS, BRAF, TP53, APC και PIK3CA. Το HROC300 T2 M1 δημιουργήθηκε σε αυτό το αυστηρά σχολιασμένο πλαίσιο, επιτρέποντας την ενσωμάτωση με αντίστοιχα κλινικοπαθολογικά δεδομένα και, όπου είναι διαθέσιμο, αντίστοιχο υλικό PDX. Ως μοντέλο καρκίνου του παχέος εντέρου χαμηλής διέλευσης, που προέρχεται από ασθενείς, το HROC300 T2 M1 είναι κατάλληλο για μελέτες της βιολογίας των όγκων, των συσχετίσεων γονότυπου-φαινότυπου και των προκλινικών θεραπευτικών δοκιμών σε ένα πλαίσιο ακριβείας στην ογκολογία.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης