- Tkanivo
- Kolorektálny
- Choroba
- Adenokarcinóm, TNM štádium T4aN1bM1R2L0V1, grading G2, Lk(n) + 3, ∑ Lk(n) 22
- Miesto metastáz
- Prítomnosť vzdialených metastáz (TNM M1; štádium T4aN1bM1R2)
Dokumenty
HROC300 T2 M1
Cell line · Číslo výrobku 300866
HROC300 T2 M1 je ľudská bunková línia kolorektálneho karcinómu odvodená z vzorky primárneho nádoru, ktorý bol odstránený dospelému pacientovi v rámci projektu HROC (Hansestadt R...
Prispôsobenie / Odporúčania
- HROC300 T2 M1Cell line€800.00
01Všeobecné informácie
- Popis
HROC300 T2 M1 je ľudská bunka kolorektálneho karcinómu odvodená z primárneho nádoru odobratého dospelému pacientovi v rámci modelovej kolekcie HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). Označenie „T2“ znamená, že nádor bol získaný pri druhom chirurgickom zákroku, zatiaľ čo „M1“ označuje zodpovedajúci in vitro model vytvorený z tejto vzorky. Platforma HROC integruje komplexné biobankovanie so štandardizovanou generáciou xenotransplantátov od pacientov (PDX) a trvalých bunkových línií s nízkym počtom pasáží, čo umožňuje molekulárne anotované nádorové modely z po sebe nasledujúcich prípadov kolorektálneho karcinómu.
Vytvorenie HROC300 T2 M1 prebiehalo podľa štandardizovaného protokolu, ktorý zahŕňal mechanickú disociáciu čerstvo resekovaného nádorového tkaniva, filtráciu na získanie suspenzií jednotlivých buniek a výsev na kultivačné platne potiahnuté kolagénom v definovanom kultivačnom médiu nádorových buniek doplnenom glutamínom, antibiotikami a antimykotikami. V rámci kohorty HROC boli trvalé primárne bunkové línie vytvorené z približne 13 % pokusov o vzorky kolorektálneho karcinómu, pričom úspešné vytvorenie korelovalo v univariačnej analýze s vyšším stupňom nádoru a pokročilým stavom uzlín. Multivariačná analýza identifikovala postihnutie uzlín ako nezávislý prediktor úspešného vytvorenia in vitro modelu. Tieto zistenia odrážajú obohatenie biologicky agresívnych fenotypov medzi úspešne adaptovanými kultúrami.
V rámci širšej kolekcie HROC modely zahŕňajú všetky hlavné molekulárne podtypy kolorektálneho karcinómu, vrátane chromozómovej nestability (CIN), fenotypu metylátora CpG ostrova (CIMP), mikrosatelitovej stability (MSS) a mikrosatelitovej nestability s vysokou hodnotou (MSI-H), ako aj rôznych mutačných pozadí ovplyvňujúcich gény, ako sú KRAS, BRAF, TP53, APC a PIK3CA. HROC300 T2 M1 bol vytvorený v tomto prísne anotovanom kontexte, čo umožňuje integráciu s zodpovedajúcimi klinicko-patologickými údajmi a, ak sú k dispozícii, s príslušným PDX materiálom. Ako model kolorektálneho karcinómu s nízkym počtom pasáží, odvodený od pacienta, je HROC300 T2 M1 vhodný na štúdium biológie nádorov, asociácií genotypu a fenotypu a na predklinické terapeutické testovanie v rámci presnej onkológie.
- Tkanivo
- Kolorektálny
- Choroba
- Adenokarcinóm, TNM štádium T4aN1bM1R2L0V1, grading G2, Lk(n) + 3, ∑ Lk(n) 22
- Miesto metastáz
- Prítomnosť vzdialených metastáz (TNM M1; štádium T4aN1bM1R2)
- Aplikácie
- Výskum kolorektálneho karcinómu; kolorektálny adenokarcinóm typu MSS; biobanka HROC Linnebacher; citlivosť na liečivá; modelovanie kolorektálneho karcinómu v pokročilom štádiu; biológia nádoru
02Klasifikácia
- Organizmus
- Človek
- Sex
- Muž
- Rastové vlastnosti
- Prívrženec
- Stav GMO
- Bez GMO
- Podrobnosti o štatúte GMO
- No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- 1
03Charakteristiky
- Morfológia
- Epitelu podobné
- Typ bunky
- Epitelové bunky
- Stav MSI
- MSS
04Identifikátory
- Citácia
- HROC300 T2 M1 (katalógové číslo Cytion 300866)
- Daňové identifikačné číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VQ94
05Manipulácia a kultivácia
- Kultivačné médium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
- Inkubačná atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplnky stravy
- Doplňte médium o 10 % FBS
- Disociačné činidlo
- Accutase
- Rozmnožovanie kultúr
- Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
- Obnova kvapaliny
- Každých 3 až 5 dní
- Rozmrazovanie a kultivácia
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola kvality a kryokonzervácia
- Sterilita
Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.
Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.
- Mrazové médium
- Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
- Podmienky skladovania
Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.
- Dopravné podmienky
Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
07Darca
- Vek darcu
- 73 rokov
- Etnická príslušnosť
- Kaukazský
08Právne informácie a bezpečnosť
- Bezpečnostné opatrenia
- Pri plánovaní uskladnenia kryovírusu v kvapalnom dusíku na budúce rozmrazenie je potrebné dodržiavať prísne bezpečnostné opatrenia. Vhodné ochranné rukavice a odev sú nevyhnutné a počas prenosu zmrazených vzoriek do nádrže s tekutým dusíkom alebo z nej sa vyžaduje používanie tvárovej masky alebo ochranných okuliarov. Je to z dôvodu zníženia rizika poranenia v dôsledku možnej explózie kryovírusu pri vyberaní, ktorá môže mať za následok vymrštenie ostrých úlomkov.
- Záruka
V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste
Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke
- Platia zmluvy s tretími stranami
- Áno