HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1 er en human kolorektal karcinomcellelinje, der stammer fra en primær tumorprøve, der er resekteret fra en voksen patient inden for HROC-modelsamlingen (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). Betegnelsen "T2" angiver, at tumoren blev udtaget ved en anden kirurgisk indgreb, mens "M1" angiver den tilsvarende in vitro-model, der er etableret ud fra denne prøve. HROC-platformen integrerer omfattende biobanking med standardiseret generering af patientafledte xenotransplantater (PDX) og permanente cellelinjer med lav passage, hvilket muliggør molekylært annoterede tumormodeller fra på hinanden følgende kolorektale kræfttilfælde.

Etableringen af HROC300 T2 M1 fulgte en standardiseret protokol, der involverede mekanisk dissociation af frisk resekteret tumorvæv, filtrering for at opnå enkeltcellesuspensioner og udsåning på kollagenbelagte kulturplader i defineret tumorcellekulturmedium tilsat glutamin, antibiotika og antimykotika. På tværs af HROC-kohorten blev der genereret permanente primære cellelinjer fra ca. 13 % af de forsøgte kolorektale karcinomprøver, hvor en vellykket etablering i univariat analyse korrelerede med højere tumorstadie og avanceret nodalstatus. Multivariat analyse identificerede nodal involvering som en uafhængig prædiktor for vellykket etablering af in vitro-modeller. Disse fund afspejler berigelsen af biologisk aggressive fænotyper blandt vellykkede tilpassede kulturer.

Inden for den bredere HROC-samling omfatter modellerne alle vigtige molekylære subtyper af kolorektal karcinom, herunder kromosomal ustabilitet (CIN), CpG-ø-methyleringsfænotype (CIMP), mikrosatellitstabil (MSS) og mikrosatellitustabilitet-høj (MSI-H) tumorer, samt forskellige mutationsbaggrunde, der påvirker gener som KRAS, BRAF, TP53, APC og PIK3CA. HROC300 T2 M1 blev genereret i denne strengt annoterede kontekst, hvilket muliggør integration med matchede klinisk-patologiske data og, hvor det er tilgængeligt, tilsvarende PDX-materiale. Som en lavpassage, patientafledt kolorektal karcinomodel er HROC300 T2 M1 velegnet til studier af tumorbiologi, genotype-fænotype-associationer og prækliniske terapeutiske test inden for en præcisionsonkologisk ramme.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring