HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1 ir cilvēka kolorektālā karcinoma šūnu līnija, kas iegūta no primārā audzēja parauga, kas izgriezts pieaugušajam pacientam HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) modeļu kolekcijā. Apzīmējums „T2” norāda, ka audzējs tika iegūts otrajā operācijas brīdī, bet „M1” apzīmē atbilstošo in vitro modeli, kas izveidots no šī parauga. HROC platforma integrē visaptverošu biobanku ar standartizētu pacientu izcelsmes ksenotransplantātu (PDX) un pastāvīgu zemu pasāžu šūnu līniju radīšanu, ļaujot izveidot molekulāri anotētus audzēju modeļus no secīgiem kolorektālā vēža gadījumiem.

HROC300 T2 M1 izveide notika saskaņā ar standartizētu protokolu, kas ietvēra svaigi izgriezta audzēja audu mehānisku disociāciju, filtrēšanu, lai iegūtu vienšūnu suspensijas, un sēšanu uz kolagēna pārklātām kultūras platēm definētā audzēja šūnu kultūras vidē, kas papildināta ar glutamīnu, antibiotikām un antimikotiskām vielām. HROC kohortā pastāvīgas primārās šūnu līnijas tika iegūtas no aptuveni 13 % mēģināto kolorektālā karcinoma paraugu, un veiksmīga izveide vienfaktoru analīzē korelēja ar augstāku audzēja pakāpi un progresējušu limfmezglu stāvokli. Daudzfaktoru analīze identificēja limfmezglu iesaistīšanos kā neatkarīgu in vitro modeļa veiksmīgas izveides prognozes rādītāju. Šie rezultāti atspoguļo bioloģiski agresīvu fenotipu bagātināšanos veiksmīgi adaptētajās kultūrās.

Plašākajā HROC kolekcijā modeļi aptver visus galvenos kolorektālās karcinomas molekulāros apakštipus, tostarp hromosomu nestabilitāti (CIN), CpG salu metilatoru fenotipu (CIMP), mikrosatelītu stabilitāti (MSS) un mikrosatelītu nestabilitāti (MSI-H), kā arī dažādus mutāciju fonus, kas ietekmē tādas gēnas kā KRAS, BRAF, TP53, APC un PIK3CA. HROC300 T2 M1 tika izveidots šajā stingri anotētajā kontekstā, ļaujot integrēt atbilstošos klīnikopatoloģiskos datus un, ja pieejams, atbilstošo PDX materiālu. Kā zema pasāža, no pacientiem iegūts kolorektālā karcinoma modelis, HROC300 T2 M1 ir piemērots audzēju bioloģijas, genotipa-fenotipa saistību un pirmsklīnisko terapeitisko testu pētījumiem precīzās onkoloģijas ietvaros.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu