HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1 je človeška celica kolorektalnega karcinoma, pridobljena iz primarnega tumorja, odstranjenega iz odraslega pacienta v okviru zbirke modelov HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). Oznaka „T2“ pomeni, da je bil tumor pridobljen v drugem kirurškem posegu, medtem ko „M1“ označuje ustrezen in vitro model, vzpostavljen iz tega vzorca. Platforma HROC združuje celovito biobanko s standardiziranim ustvarjanjem pacientovih ksenotransplantatov (PDX) in trajnih celičnih linij z nizkim številom prehodov, kar omogoča molekularno označene tumorje iz zaporednih primerov kolorektalnega raka.

Ustanovitev HROC300 T2 M1 je potekala po standardiziranem protokolu, ki vključuje mehansko disociacijo sveže odstranjenega tumorja, filtracijo za pridobitev suspenzij enoceličnih celic in sejanje na s kolagenom prevlečene kultivne plošče v definiranem kultivnem mediju za tumorske celice, dopolnjenem z glutaminom, antibiotiki in antimikotiki. V kohorti HROC so bile trajne primarne celične linije ustvarjene iz približno 13 % poskusnih vzorcev kolorektalnega karcinoma, pri čemer je bila uspešna vzpostavitev v enovariantni analizi povezana z višjo stopnjo tumorja in naprednim stanjem bezgavk. Multivariatna analiza je identificirala vpletenost bezgavk kot neodvisni napovednik uspešne vzpostavitve in vitro modela. Ti izsledki odražajo obogatitev biološko agresivnih fenotipov med uspešno prilagojenimi kulturami.

V širši zbirki HROC modeli zajemajo vse glavne molekularne podtipe kolorektalnega karcinoma, vključno s kromosomsko nestabilnostjo (CIN), fenotipom metilatorja CpG otoka (CIMP), mikrosatelitsko stabilnimi (MSS) in mikrosatelitsko nestabilnimi (MSI-H) tumorji, kot tudi različnimi mutacijskimi ozadji, ki vplivajo na gene, kot so KRAS, BRAF, TP53, APC in PIK3CA. HROC300 T2 M1 je bil ustvarjen v tem strogo opremljenem kontekstu, kar omogoča integracijo z ustreznimi kliničnopatološkimi podatki in, kjer je to mogoče, ustreznim PDX materialom. Kot model kolorektalnega karcinoma z nizkim številom prehodov, pridobljen iz pacientov, je HROC300 T2 M1 primeren za študije tumorje biologije, povezav genotipa in fenotipa ter predkliničnega testiranja terapij v okviru natančne onkologije.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo