HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1 es una línea celular de carcinoma colorrectal humano derivada de una muestra de tumor primario extirpada de un paciente adulto dentro de la colección de modelos HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). La designación «T2» indica que el tumor se obtuvo en una segunda intervención quirúrgica, mientras que «M1» denota el modelo in vitro correspondiente establecido a partir de esta muestra. La plataforma HROC integra un biobanco completo con la generación estandarizada de xenoinjertos derivados de pacientes (PDX) y líneas celulares permanentes de bajo paso, lo que permite obtener modelos tumorales con anotaciones moleculares a partir de casos consecutivos de cáncer colorrectal.

El establecimiento de HROC300 T2 M1 siguió un protocolo estandarizado que implicaba la disociación mecánica del tejido tumoral recién resecado, la filtración para obtener suspensiones de células individuales y la siembra en placas de cultivo recubiertas de colágeno en un medio de cultivo de células tumorales definido, suplementado con glutamina, antibióticos y antimicóticos. En toda la cohorte HROC, se generaron líneas celulares primarias permanentes a partir de aproximadamente el 13 % de las muestras de carcinoma colorrectal intentadas, y el establecimiento exitoso se correlacionó en el análisis univariante con una mayor clasificación tumoral y un estado ganglionar avanzado. El análisis multivariante identificó la afectación ganglionar como un predictor independiente del establecimiento exitoso del modelo in vitro. Estos hallazgos reflejan el enriquecimiento de fenotipos biológicamente agresivos entre los cultivos adaptados con éxito.

Dentro de la colección más amplia de HROC, los modelos abarcan todos los subtipos moleculares principales del carcinoma colorrectal, incluidos los tumores con inestabilidad cromosómica (CIN), fenotipo metilador de islas CpG (CIMP), microsatélites estables (MSS) y microsatélites altamente inestables (MSI-H), así como diversos antecedentes mutacionales que afectan a genes como KRAS, BRAF, TP53, APC y PIK3CA. El HROC300 T2 M1 se generó en este contexto rigurosamente anotado, lo que permite la integración con datos clínico-patológicos coincidentes y, cuando están disponibles, con el material PDX correspondiente. Como modelo de carcinoma colorrectal derivado de pacientes y de bajo paso, el HROC300 T2 M1 es adecuado para estudios de biología tumoral, asociaciones genotipo-fenotipo y pruebas terapéuticas preclínicas dentro de un marco de oncología de precisión.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía