HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1 je lidská buněčná linie kolorektálního karcinomu odvozená z primárního nádorového vzorku resekovaného u dospělého pacienta v rámci modelové sbírky HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). Označení „T2“ znamená, že nádor byl získán při druhém chirurgickém zákroku, zatímco „M1“ označuje odpovídající in vitro model vytvořený z tohoto vzorku. Platforma HROC integruje komplexní biobanking se standardizovanou generací xenotransplantátů odvozených od pacientů (PDX) a trvalých buněčných linií s nízkým počtem pasáží, což umožňuje molekulárně anotované nádorové modely z po sobě jdoucích případů kolorektálního karcinomu.

Vytvoření HROC300 T2 M1 proběhlo podle standardizovaného protokolu zahrnujícího mechanickou disociaci čerstvě resekované nádorové tkáně, filtraci za účelem získání suspenzí jednotlivých buněk a výsev na kolagenem potažené kultivační destičky v definovaném kultivačním médiu pro nádorové buňky doplněném glutaminem, antibiotiky a antimykotiky. V celé kohortě HROC byly trvalé primární buněčné linie generovány z přibližně 13 % pokusů o vzorky kolorektálního karcinomu, přičemž úspěšné vytvoření korelovalo v univariantní analýze s vyšším stupněm nádoru a pokročilým stavem uzlin. Multivariantní analýza identifikovala postižení uzlin jako nezávislý prediktor úspěšného vytvoření in vitro modelu. Tyto nálezy odrážejí obohacení biologicky agresivních fenotypů mezi úspěšně adaptovanými kulturami.

V rámci širší sbírky HROC zahrnují modely všechny hlavní molekulární podtypy kolorektálního karcinomu, včetně chromozomální nestability (CIN), fenotypu metylátoru CpG ostrovů (CIMP), mikrosatelitní stability (MSS) a mikrosatelitní nestability s vysokou mírou (MSI-H), jakož i různorodé mutační pozadí ovlivňující geny jako KRAS, BRAF, TP53, APC a PIK3CA. HROC300 T2 M1 byl vytvořen v tomto přísně anotovaném kontextu, což umožňuje integraci s odpovídajícími klinicko-patologickými údaji a, pokud jsou k dispozici, s odpovídajícím PDX materiálem. Jako model kolorektálního karcinomu s nízkým počtem pasáží odvozený od pacienta je HROC300 T2 M1 vhodný pro studie biologie nádorů, asociací genotypu a fenotypu a preklinického terapeutického testování v rámci přesné onkologie.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení