HROC300 T2 M1

A HROC300 T2 M1 egy humán kolorektális karcinóma sejtvonal, amely a HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) modellgyűjteményben szereplő, felnőtt betegtől eltávolított primer tumor mintából származik. A „T2” jelölés azt jelzi, hogy a tumort egy második műtéti időpontban nyerték, míg az „M1” jelölés az ebből a mintából létrehozott megfelelő in vitro modellt jelöli. A HROC platform integrálja a átfogó biobankolást a betegektől származó xenotranszplantátumok (PDX) és állandó, alacsony passzálású sejtvonalak szabványosított előállításával, lehetővé téve molekulárisan annotált tumor modellek létrehozását egymást követő kolorektális rákos esetekből.

A HROC300 T2 M1 létrehozása egy szabványosított protokollt követett, amely magában foglalta a frissen eltávolított tumor szövet mechanikus szétválasztását, szűrést az egysejtes szuszpenziók előállításához, valamint a kollagénnel bevont tenyésztőlapokra való vetést glutaminnal, antibiotikumokkal és antimikotikumokkal kiegészített, meghatározott tumorsejt-tenyésztő tápközegben. A HROC kohortban az állandó elsődleges sejtvonalakat a megkísérelt kolorektális karcinóma minták körülbelül 13%-ából állították elő, és az egyváltozós elemzésben a sikeres létrehozás korrelált a magasabb tumorosztályozással és a fejlett nyirokcsomó-státusszal. A többváltozós elemzés a nyirokcsomó-bevonást azonosította a sikeres in vitro modell létrehozásának független előrejelzőjeként. Ezek az eredmények a sikeresen adaptált kultúrák között a biológiailag agresszív fenotípusok gazdagodását tükrözik.

A szélesebb HROC-gyűjteményen belül a modellek a kolorektális karcinóma összes főbb molekuláris altípusát lefedik, beleértve a kromoszómális instabilitást (CIN), a CpG-sziget metiláló fenotípust (CIMP), a mikroszatellit-stabil (MSS) és a mikroszatellit-instabilitás magas (MSI-H) tumorokat, valamint a KRAS, BRAF, TP53, APC és PIK3CA géneket. A HROC300 T2 M1-et ebben a szigorúan annotált kontextusban hozták létre, lehetővé téve az illeszkedő klinikai-patológiai adatokkal és, amennyiben rendelkezésre áll, a megfelelő PDX anyaggal való integrációt. Alacsony passzálású, páciensből származó kolorektális karcinóma modellként a HROC300 T2 M1 alkalmas tumorbiológiai, genotípus-fenotípus összefüggések és preklinikai terápiás vizsgálatok tanulmányozására a precíziós onkológia keretein belül.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban