HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1 er en humant kolorektal karsinomcellelinje avledet fra en primær tumorprøve resektert fra en voksen pasient i HROC-modellsamlingen (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). Betegnelsen «T2» indikerer at svulsten ble hentet ved et andre kirurgisk tidspunkt, mens «M1» angir den tilsvarende in vitro-modellen som ble etablert fra denne prøven. HROC-plattformen integrerer omfattende biobanking med standardisert generering av pasientavledede xenotransplantater (PDX) og permanente cellelinjer med lav passasje, noe som muliggjør molekylært annoterte svulstmodeller fra påfølgende kolorektale krefttilfeller.

Etableringen av HROC300 T2 M1 fulgte en standardisert protokoll som involverte mekanisk dissosiasjon av ferskt resektert tumorvev, filtrering for å oppnå enkeltcellesuspensjoner og såing på kollagenbelagte kulturplater i definert tumorcellekulturmedium tilsatt glutamin, antibiotika og antimykotika. I hele HROC-kohorten ble permanente primære cellelinjer generert fra omtrent 13 % av forsøkte kolorektale karsinomprøver, med vellykket etablering som korrelerte i univariat analyse med høyere tumorvurdering og avansert nodalstatus. Multivariat analyse identifiserte nodal involvering som en uavhengig prediktor for vellykket etablering av in vitro-modeller. Disse funnene gjenspeiler berikelsen av biologisk aggressive fenotyper blant vellykkede tilpassede kulturer.

Innenfor den bredere HROC-samlingen omfatter modellene alle viktige molekylære subtyper av kolorektal karsinom, inkludert kromosomalt ustabilitet (CIN), CpG-øy-metylatorfenotype (CIMP), mikrosatellittstabil (MSS) og mikrosatellittinstabilitet-høy (MSI-H) svulster, samt ulike mutasjonsbakgrunner som påvirker gener som KRAS, BRAF, TP53, APC og PIK3CA. HROC300 T2 M1 ble generert i denne strengt annoterte konteksten, noe som muliggjør integrering med tilpassede klinisk-patologiske data og, der det er tilgjengelig, tilsvarende PDX-materiale. Som en lavpassasje, pasientavledet kolorektal karsinommodell, er HROC300 T2 M1 egnet for studier av tumorbiologi, genotype-fenotype-assosiasjoner og preklinisk terapeutisk testing innenfor et presisjonsonkologisk rammeverk.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring