HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1 è una linea cellulare di carcinoma colorettale umano derivata da un campione di tumore primario asportato da un paziente adulto all'interno della collezione di modelli HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). La designazione "T2" indica che il tumore è stato ottenuto in un secondo momento chirurgico, mentre "M1" indica il corrispondente modello in vitro stabilito da questo campione. La piattaforma HROC integra una biobanca completa con la generazione standardizzata di xenotrapianti derivati da pazienti (PDX) e linee cellulari permanenti a basso passaggio, consentendo modelli tumorali annotati a livello molecolare da casi consecutivi di cancro colorettale.

La creazione di HROC300 T2 M1 ha seguito un protocollo standardizzato che prevedeva la dissociazione meccanica del tessuto tumorale appena asportato, la filtrazione per ottenere sospensioni di cellule singole e la semina su piastre di coltura rivestite di collagene in un terreno di coltura cellulare tumorale definito, integrato con glutammina, antibiotici e antimicotici. Nell'ambito della coorte HROC, sono state generate linee cellulari primarie permanenti da circa il 13% dei campioni di carcinoma colorettale analizzati, con un successo correlato, nell'analisi univariata, a un grado tumorale più elevato e a uno stato linfonodale avanzato. L'analisi multivariata ha identificato il coinvolgimento linfonodale come fattore predittivo indipendente del successo nella creazione di modelli in vitro. Questi risultati riflettono l'arricchimento di fenotipi biologicamente aggressivi tra le colture adattate con successo.

All'interno della più ampia collezione HROC, i modelli comprendono tutti i principali sottotipi molecolari di carcinoma colorettale, compresi i tumori con instabilità cromosomica (CIN), fenotipo metilatore dell'isola CpG (CIMP), microsatellite stabile (MSS) e microsatellite altamente instabile (MSI-H), nonché diversi background mutazionali che interessano geni come KRAS, BRAF, TP53, APC e PIK3CA. HROC300 T2 M1 è stato generato in questo contesto rigorosamente annotato, consentendo l'integrazione con dati clinico-patologici corrispondenti e, ove disponibili, con il materiale PDX corrispondente. Essendo un modello di carcinoma colorettale a basso passaggio derivato da pazienti, HROC300 T2 M1 è adatto per studi di biologia tumorale, associazioni genotipo-fenotipo e test terapeutici preclinici nell'ambito di un quadro di oncologia di precisione.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia