HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1 to ludzka linia komórkowa raka jelita grubego pochodząca z pierwotnej próbki guza pobranej od dorosłego pacjenta w ramach kolekcji modeli HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). Oznaczenie „T2” wskazuje, że guz został pobrany podczas drugiej operacji, natomiast „M1” oznacza odpowiedni model in vitro utworzony na podstawie tej próbki. Platforma HROC łączy kompleksowe biobankowanie ze standardowym wytwarzaniem przeszczepów heterogenicznych pochodzących od pacjentów (PDX) i stałych linii komórkowych o niskiej liczbie pasażów, umożliwiając tworzenie modeli nowotworów z adnotacjami molekularnymi na podstawie kolejnych przypadków raka jelita grubego.

Utworzenie HROC300 T2 M1 nastąpiło zgodnie ze standardową procedurą obejmującą mechaniczne rozdzielenie świeżo wyciętej tkanki nowotworowej, filtrację w celu uzyskania zawiesiny pojedynczych komórek oraz wysiew na pokryte kolagenem płytki hodowlane w określonym podłożu hodowlanym komórek nowotworowych uzupełnionym glutaminą, antybiotykami i lekami przeciwgrzybiczymi. W całej kohorcie HROC stałe pierwotne linie komórkowe wygenerowano z około 13% próbek raka jelita grubego, a pomyślne ustanowienie korelowało w analizie jednoczynnikowej z wyższym stopniem złośliwości guza i zaawansowanym stanem węzłów chłonnych. Analiza wieloczynnikowa wykazała, że zajęcie węzłów chłonnych jest niezależnym czynnikiem prognostycznym pomyślnego ustanowienia modelu in vitro. Wyniki te odzwierciedlają wzbogacenie biologicznie agresywnych fenotypów wśród pomyślnie przystosowanych kultur.

W ramach szerszej kolekcji HROC modele obejmują wszystkie główne podtypy molekularne raka jelita grubego, w tym nowotwory z niestabilnością chromosomową (CIN), fenotyp metylacji wysp CpG (CIMP), stabilne mikrosatelitarne (MSS) i wysokie niestabilności mikrosatelitarne (MSI-H), a także różnorodne tło mutacyjne wpływające na geny, takie jak KRAS, BRAF, TP53, APC i PIK3CA. HROC300 T2 M1 został wygenerowany w tym rygorystycznie opisanym kontekście, co pozwala na integrację z dopasowanymi danymi kliniczno-patologicznymi i, w miarę dostępności, odpowiednim materiałem PDX. Jako model raka jelita grubego pochodzący od pacjenta o niskiej liczbie pasażów, HROC300 T2 M1 nadaje się do badań nad biologią nowotworów, powiązaniami genotyp-fenotyp oraz przedklinicznych testów terapeutycznych w ramach precyzyjnej onkologii.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym