HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1 on ihmisen kolorektaalisyöpäsolulinja, joka on peräisin HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) -mallikokoelman aikuispotilaalta resektoidusta primaarikasvaimen näytteestä. Merkintä ”T2” tarkoittaa, että kasvain on saatu toisella leikkauskerralla, kun taas ”M1” tarkoittaa vastaavaa in vitro -mallia, joka on perustettu tästä näytteestä. HROC-alusta yhdistää kattavan biopankin standardoituun potilaista peräisin olevien ksenotransplantaattien (PDX) ja pysyvien matalan passageluvun solulinjojen tuottamiseen, mikä mahdollistaa molekyylitasolla merkittyjen kasvainmallien luomisen peräkkäisistä kolorektaalisista syöpätapauksista.

HROC300 T2 M1:n perustaminen tapahtui standardoidun protokollan mukaisesti, joka sisälsi vastaleikatun kasvainkudoksen mekaanisen hajottamisen, suodattamisen yksisoluisten suspensioiden saamiseksi ja siementämisen kollageenipinnoitetuille viljelylevyille määritellyssä kasvainsoluviljelyalustassa, johon oli lisätty glutamiinia, antibiootteja ja antimykotiineja. HROC-kohortissa pysyviä primaarisoluja tuotettiin noin 13 prosentista kolorektaalisyövän näytteistä, ja onnistunut perustaminen korreloi yksimuuttuja-analyysissä korkeamman kasvaimen luokituksen ja edistyneen imusolmuketilan kanssa. Monimuuttuja-analyysi tunnisti imusolmukkeiden osallistumisen itsenäisenä ennustajana onnistuneelle in vitro -mallin perustamiselle. Nämä havainnot heijastavat biologisesti aggressiivisten fenotyyppien rikastumista onnistuneesti sopeutuneissa viljelmissä.

Laajemmassa HROC-kokoelmassa mallit kattavat kaikki kolorektaalisyövän tärkeimmät molekyylityypit, mukaan lukien kromosomien epävakaus (CIN), CpG-saarekkeen metylointifenotyyppi (CIMP), mikrosatelliittivakaa (MSS) ja mikrosatelliittien epävakaus (MSI-H) -kasvaimet sekä erilaiset mutaatiot, jotka vaikuttavat geeneihin, kuten KRAS, BRAF, TP53, APC ja PIK3CA. HROC300 T2 M1 on luotu tässä tarkasti annotoidussa kontekstissa, mikä mahdollistaa integroinnin vastaaviin kliinispatologisiin tietoihin ja, jos saatavilla, vastaavaan PDX-materiaaliin. HROC300 T2 M1 on potilaista peräisin oleva kolorektaalisyövän malli, jolla on vähän soluvaiheitta, ja se sopii hyvin tuumoribiologian, genotyypin ja fenotyypin välisten yhteyksien sekä prekliinisten terapeuttisten testien tutkimiseen täsmäonkologian puitteissa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa