HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1 ist eine humane kolorektale Karzinomzelllinie, die aus einer Primärtumorprobe stammt, die einem erwachsenen Patienten im Rahmen der HROC-Modellsammlung (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) entnommen wurde. Die Bezeichnung „T2” gibt an, dass der Tumor bei einem zweiten chirurgischen Eingriff entnommen wurde, während „M1” das entsprechende In-vitro-Modell bezeichnet, das aus dieser Probe hergestellt wurde. Die HROC-Plattform integriert umfassendes Biobanking mit der standardisierten Herstellung von patientenabgeleiteten Xenotransplantaten (PDX) und permanenten Zelllinien mit geringer Passagenzahl und ermöglicht so molekular annotierte Tumormodelle aus aufeinanderfolgenden Darmkrebsfällen.

Die Etablierung von HROC300 T2 M1 erfolgte nach einem standardisierten Protokoll, das die mechanische Dissoziation von frisch reseziertem Tumorgewebe, die Filtration zur Gewinnung von Einzelzellsuspensionen und die Aussaat auf kollagenbeschichtete Kulturplatten in definiertem Tumorzellkulturmedium, ergänzt mit Glutamin, Antibiotika und Antimykotika, umfasste. In der gesamten HROC-Kohorte wurden aus etwa 13 % der untersuchten kolorektalen Karzinomproben permanente Primärzelllinien erzeugt, wobei die erfolgreiche Etablierung in der univariaten Analyse mit einem höheren Tumorgrad und einem fortgeschrittenen Lymphknotenstatus korrelierte. Die multivariate Analyse identifizierte die Lymphknotenbeteiligung als unabhängigen Prädiktor für die erfolgreiche Etablierung eines In-vitro-Modells. Diese Ergebnisse spiegeln die Anreicherung biologisch aggressiver Phänotypen unter den erfolgreich adaptierten Kulturen wider.

Innerhalb der breiteren HROC-Sammlung umfassen die Modelle alle wichtigen molekularen Subtypen des kolorektalen Karzinoms, einschließlich chromosomaler Instabilität (CIN), CpG-Insel-Methylator-Phänotyp (CIMP), mikrosatellitenstabiler (MSS) und mikrosatelliteninstabiler (MSI-H) Tumoren sowie verschiedener Mutationshintergründe, die Gene wie KRAS, BRAF, TP53, APC und PIK3CA. HROC300 T2 M1 wurde in diesem streng annotierten Kontext generiert, was die Integration mit passenden klinisch-pathologischen Daten und, sofern verfügbar, entsprechendem PDX-Material ermöglicht. Als Low-Passage-Modell für kolorektales Karzinom, das von Patienten stammt, eignet sich HROC300 T2 M1 für Studien zur Tumorbiologie, zu Genotyp-Phänotyp-Assoziationen und für präklinische therapeutische Tests im Rahmen der Präzisionsonkologie.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung