الخلايا الكيراتينية للبشرة البشرية

الخلايا الكيراتينية البشرية (HEKs) هي خلايا ظهارية أولية معزولة من البشرة البشرية، وعادة ما يتم الحصول عليها من القلفة الوليدية أو أنسجة الجلد البالغ. تمثل هذه الخلايا النوع السائد من خلايا البشرة وهي مسؤولة عن تكوين وصيانة وتجديد الظهارة الحرشفية الطبقية. في المختبر، تظهر خلايا HEKs شكلًا مميزًا يشبه الحصى عند زراعتها في ظروف منخفضة الكالسيوم تدعم حالة تكاثرية تشبه القاعدة. عند ارتفاع الكالسيوم أو في ظروف تحفز التمايز، تخضع هذه الخلايا لبرنامج محدد جيدًا من الطبقات والتمايز النهائي، مما يلخص الجوانب الرئيسية لتطور البشرة.

نظرًا لأن خلايا HEK تحافظ على العديد من الخصائص الفسيولوجية للبشرة الأصلية، فهي تستخدم على نطاق واسع في مزارع أحادية الطبقة ثنائية الأبعاد وكذلك في نظائر الجلد ثلاثية الأبعاد المتطورة التي تعيد إنتاج طبقات البشرة وتشكيل الحاجز. كخلايا أولية، لها عمر محدود وقدرة تكاثرية محدودة، ويمكن أن يختلف شكلها الظاهري اعتمادًا على مصدر المتبرع وظروف المزرعة. لذلك، فإن التحكم الدقيق في عدد الممرات وحالة التمايز ضروري لتكرار التجارب ولنمذجة بيولوجيا الجلد الطبيعي وعمليات الأمراض الجلدية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of keratinocyte growth medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of keratinocyte growth medium. Check cell number and viability.

4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

8. Recommended seeding density: more than 6,000 cells/cm².

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان