Keratinosit Epidermis Manusia

Sel Epidermal Keratinosit Manusia (HEKs) adalah sel epitel primer yang diisolasi dari epidermis kulit manusia, biasanya diperoleh dari kulit penis bayi baru lahir atau jaringan kulit dewasa. Sel-sel ini mewakili jenis sel utama epidermis dan bertanggung jawab atas pembentukan, pemeliharaan, dan regenerasi epitel skuamosa berlapis. Dalam kultur in vitro, HEKs menunjukkan morfologi batu bata yang khas saat dikultur dalam kondisi kalsium rendah yang mendukung keadaan proliferatif dan basal. Saat kalsium meningkat atau dalam kondisi yang memicu diferensiasi, sel-sel ini menjalani program diferensiasi yang terdefinisi dengan baik, termasuk stratifikasi dan diferensiasi terminal, yang meniru aspek kunci perkembangan epidermis.

Karena HEK mempertahankan banyak karakteristik fisiologis epidermis asli, sel-sel ini secara luas digunakan dalam kultur monolayer 2D serta dalam model kulit organotipik 3D canggih yang mereplikasi stratifikasi epidermis dan pembentukan barrier. Sebagai sel primer, HEK memiliki umur terbatas dan kapasitas proliferasi yang terbatas, dan fenotipnya dapat bervariasi tergantung pada sumber donor dan kondisi kultur. Oleh karena itu, pengendalian yang cermat terhadap jumlah passage dan keadaan diferensiasi sangat penting untuk reproduibilitas eksperimental dan untuk memodelkan biologi kulit normal serta proses penyakit dermatologis.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of keratinocyte growth medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of keratinocyte growth medium. Check cell number and viability.

4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

8. Recommended seeding density: more than 6,000 cells/cm².

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami