Кератиноцити епідермісу людини

Людські епідермальні кератиноцити (HEK) — це первинні епітеліальні клітини, виділені з епідермісу людської шкіри, які зазвичай отримують з передньої шкіри новонароджених або шкірної тканини дорослих. Ці клітини є основним типом клітин епідермісу і відповідають за формування, підтримку та регенерацію багатошарового плоского епітелію. In vitro HEKs демонструють характерну бруківку морфологію при культивуванні в умовах низького вмісту кальцію, що підтримує проліферативний, базальний стан. При підвищенні рівня кальцію або в умовах, що індукують диференціацію, вони проходять чітко визначену програму стратифікації та термінальної диференціації, повторюючи ключові аспекти розвитку епідермісу.

Оскільки HEK зберігають багато фізіологічних характеристик природного епідермісу, вони широко використовуються в 2D моношарових культурах, а також в сучасних 3D органотипних еквівалентах шкіри, що відтворюють стратифікацію епідермісу та формування бар'єру. Як первинні клітини, вони мають обмежений термін життя та обмежену проліферативну здатність, а їх фенотип може варіюватися залежно від джерела донора та умов культивування. Тому ретельний контроль кількості пасажів та стану диференціації є необхідним для відтворюваності експериментів та моделювання нормальної біології шкіри та процесів дерматологічних захворювань.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of keratinocyte growth medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of keratinocyte growth medium. Check cell number and viability.

4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

8. Recommended seeding density: more than 6,000 cells/cm².

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>